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r-pcr技术在植物检疫性病害检测中的应用 随着现代生物技术的发展，尤其是分子生物技术的发展，植物检验检疫技术也取得了很大进步，为中国的病虫害检测做出了巨大贡献。但植物检疫技术与横向的相关领域如人类医学诊断、动物医学诊断以及食品微生物检测等相比,在总体水平上还存在着较大的差距。在检疫性有害生物的诊断技术上提高检测的准确性、灵敏度和缩短检验时间、简化检测程序是植物检疫工作面临的重要课题。随着PCR技术的日趋成熟和广泛应用,为检疫性有害生物的检测提供了很好的平台。本文通过阐述传统PCR技术及改进PCR技术在植物检疫性病害检测中的应用,来说明目前检验检疫技术在分子水平上的发展情况。 1 pcr扩增研究 PCR(polymerase chain reaction)技术即聚合酶链式反应技术,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。该技术自从Mullis等在1985年创立以来,PCR方法已成为分子生物学及其相关领域的经典试验方法。此法灵敏、准确、方便、快速,可在短时间内扩增出数百万个特异DNA序列的拷贝。随着植物检疫技术的发展,PCR技术在植物检疫中的应用显示了广泛前景。 1.1 烟草环斑病毒病 在检疫性有害生物的类别中,病毒的检测和鉴定是最困难的。但分子生物学的方法将病毒检测灵敏度由血清学的ng水平提高到了pg级,用特异引物的PCR测定方法则更加灵敏。20世纪末以来,许多发达国家开