基因工程期末复习题(含答案).docxVIP

一、填空题 1、基因文库的构建通常采用 cDNA 法和鸟枪法 两种方法。 2 、限制性内切酶识别序列的结构普通为具有 180 度旋转对称 的回文结 构。 构 3、DNA 连接酶主要有两种： T4 噬菌体 和大肠杆菌 DAN 连接酶 。 4、根据质粒在宿主细胞中所含拷贝数的多少，可以把质粒分为两种类型： 密切型质粒 和松弛型质粒 。 5、原核受体细胞通常包括 大肠杆菌、枯草芽孢杆菌 和蓝细菌。 6、原核生物或者低等真核生物， 将外源重组 DNA 导入受体细胞的方法有借助 生物载体的 转化、转染 、转导。 7、对细菌细胞进行转化的关键是细胞处于感受态 。 8、 基因工程是_____1970’____年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 9、部份酶切可采取的措施有： (1)减少酶量； (2)缩短反应时间； (3)增大反 应体积等。 10、第一个分离的限制性内切核酸酶是 EcoK；而第一个用于构建重组体的 限制性内切核酸酶是 EcoRl。 11、DNA 聚合酶 I 的 Klenow 大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割 DNA 聚合酶 I 得到的份子量为 76kDa 的大片段，具有两种酶活性： (1)5-3合成酶 的活性； (2)3-5外切核酸酶的活性。 12、为了防止 DNA 的自身环化，可用_碱性磷酸酶__去双链 DNA_ 5’端的 磷酸 基团_。 13、测序酶是修饰了的 T7 DNA 聚合酶，它惟独 5-3合成酶的活性，而没 有 3-5 外切酶的活性。 14、切口移位(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于利用 DNA 聚 合 酶 I 的 5一 3合成酶和 5一 3合成酶的作用。 15、欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 份子转变成平末端的双链形式， 通常可采用 S1 核酸酶切割或者 DNA 聚合酶补平。 16、反转录酶除了催化 DNA 的合成外，还具有核酸水解酶 H 的作用，可以 将 DNA-RNA 杂种双链中的 RNA 水解掉。 17、pBR322 是一种改造型的质粒， 它的复制子来源于 pMBl，它的四环素 抗 性基 因来自于 pSCl01， 18、pSCl01 是一种严紧复制的质粒。 19、pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC 系列的载体是通过 pBR322 和 M13 两种质粒改造而来。 20、野生型的 M13 不适合用作基因工程载体，主要原因是没有合适的限制 性内 切核酸酶识别位点和选择标记。 21、黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自质粒、COS 位 点序列来自 λ 噬菌体，最大的克隆片段达到 45kb。 22、 野生型的 λ 噬菌体 DNA 不宜作为基因工程载体，原因是： (1)份子 量大， (2)酶的多切点， (3)无选择标记。 23、能够将 5`突出末端切除的是 S1 核苷酸酶，或者用 Klenow 酶补平，然 后将两平末端连接。相反， 3’突出末端的黏性末端用T4DNA 聚合酶 将两者 的突出末端切除，然后将产生的平末端连接。 24、λ噬菌体载体由于受到包装的限制， 插入外源 DNA 片段后，总的长度 应 在噬菌体基因组的 75%-105%的范围内。 25、黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自质粒、COS 位 点序列来自 λ噬菌体，最大的克隆片段达到 45kb。 26、为了防止 DNA 的自身环化，可用碱性磷酸酶去双链 DNA5’端的磷酸基 团。 27、限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的， 第一个大写字 母取自属名；第二、三两个字母取自种名 ；第四个字母 则用宿主菌的株或者 型表示。 28、噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA 共同构成的，其中来自质粒的主要结构 是复制区，而来自噬菌体的主要结构是 IG 区。 29、λ 噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源 DNA 片段后，总的长度 应在噬菌体基因组的 75％~105％的范围内。 30、Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端，而是 有一个突出碱基末端的双链 DNA 份子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物 的 T-载体。 31、在 cDNA 的合成中要用到 S1 核酸酶，其作用是切除在第二链合成时形成 的发夹环。 32、受体细胞的感受态是接受外源 DNA 的生理状态_。 33、只要知道基因组中某一特定区域的部份核苷酸组成， 用聚合酶链式反应 (PCR)可以将这段 DNA 进行百万倍的扩增。 34、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为 0°C 时吸附DNA,42°C 时摄人DNA。 35、如果用限制性内切核酸酶切割双链 DN