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天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育的影响 拉普拉斯，又名菜粉蝶、菜白蝶和白粉蝶。幼虫被称为菜绿虫，属于盲目粉蝶科，是一种慢性疾病。幼虫通常吃东西，把东西咬到叶背后，留下表皮。随着虫龄的增加，它们会被咬成一个洞。如果严重，只有叶脉和叶柄才能死亡。当幼苗死亡时，整个植物就会死亡。当幼虫排出的粪便污染叶片时，蔬菜就会变质。感染的伤口是细菌气机的路径，并会导致软腐病和其他疾病。 小菜蛾Plutella xylostella L,属鳞翅目菜蛾科,俗称菜蛾、两头尖,是世界性害虫,国内各省、市、县、区均有分布.适应环境能力强,世代周期短,繁殖系数高,世代重叠严重,在气候温和的地区,田间终年可见到各种虫态,无越冬越夏现象,如遇到少雨的季节极易爆发成灾.近十几年来,随着种植方式结构调整,保护地蔬菜迅速发展,小菜蛾的危害呈明显上升趋势.针对这样的现状,随着人们对环境认识的提高,对蔬菜质量的要求也在提高,这使得化学防治不能满足时代的要求,寻找经济、有效、安全防治两大蔬菜重要害虫的方法和药剂成为农药工作者普遍关注的问题. 天葵semiaquilegia adoxoides(DC) Makino,又名天葵子、小乌头、紫背天葵,在贵州、四川等地称千年耗子屎.毛茛科天葵属,为多年生草本植物,广泛分布于长江中、下游各省,南达广东北部,北达陕西南部.喜在山野林荫地生长.茎高10～32 cm,数茎丛生,直立而纤细,密被白色细柔毛.基生叶为三出复叶,有叶柄,柄基部扩张而成鞘状,小叶阔楔形,长1.5～2 cm,三裂,裂片先端圆形并有2或3个圆锯齿,有细柔毛,背面紫色.三、四月花单生于茎顶,花小,白色或带紫色.种子细小,地下块根黑色,通常呈椭圆形或纺锤形,表面光滑,灰黑色,内部白色.据中国土农药志记载,天葵对蚜虫、红蜘蛛和稻螟具有一定的杀虫作用.李明等报道了天葵块根95%乙醇提取液对小菜蛾幼虫的选择性拒食作用和非选择性拒食作用,2003年罗世琼等对其块根不同有机溶剂提取物进行研究,结果表明天葵块根石油醚提取物对菜青虫Pieris.rapae L.和小菜蛾Plutella xylostellaL.幼虫具有良好的拒食作用,随后对其化学成分研究表明,在天葵块根各馏份中精油部分对菜青虫的拒食和胃毒效果最好. 本文主要研究天葵semiaquilegia adoxoide块根提取物对菜青虫Pieris.rapae L、小菜蛾Plutella xylostella L.幼虫生长发育的影响,是在上述研究的基础上进行的初步探讨,旨在为安全、高效植物性杀虫剂新品种的开发应用及仿生合成提供理论依据. 1 材料和方法 1.1 小菜砂幼虫的饲养 天葵semiaquilegia adoxoides块根采于野外.自然风干后,于45℃烘箱烘干,粉碎备用. 菜青虫从室外采回各龄幼虫若干,室内饲养3 d后,用游标卡尺测其头壳大小,据此来区分不同的虫龄,然后选取4龄幼虫作药效供试. 小菜蛾幼虫是室内饲养的,其饲养方法为:最初从羊艾劳改农场甘蓝地采回幼虫若干,选取生长发育状况良好的幼虫接种到无农药的鲜活甘蓝上,在温度为20℃～26℃,相对湿度为50%～70%的环境条件下饲养.待化蛹后,用镊子小心将蛹置于装有湿润滤纸的培养皿中.再将装有蛹的培养皿置于饲养箱里,待蛹羽化为成虫后,取干净滤纸用水湿润,再涂以10%的蜂蜜,置于饲养箱中提供小菜蛾成虫补充营养.同时在饲养箱中装入大小适中的鲜嫩甘蓝,以利小菜蛾产卵,反复以上饲养操作,最后到3代以上取3龄幼虫作活性测定. 1.3 c.油醚提取物和c-油状提取物-柱层析-分离 称取天葵干粉4 kg,经石油醚在70℃回流提取12 h,重复3次,合并提取液,过滤,滤液经蒸干而得石油醚提取物,石油醚提取物经柱层析,用柱层析硅胶经氯仿冲柱而得油状提取物和结晶提取物,以油状提取物供药效试验. 1.4 浓度梯度试验 为了减少有机溶剂对试虫的毒副作用,采用丙酮配制药液,稀释5个浓度梯度,分别为800 mg/L,400 mg/L,200 mg/L,100 mg/L,50 mg/L,对照用丙酮. 1.5 试虫的饲养及分级 对幼虫生长发育影响的研究,采用浸渍叶碟法处理试虫.用无农药的新鲜甘蓝叶碟,剪成4 cm×4 cm,将叶碟置于药液中浸泡1～2 s,取出凉干,对照用丙酮浸泡.将处理好的甘蓝叶碟放入装有湿润滤纸的培养皿中,然后将试虫接入,再盖上湿润纱布一张.各处理重复5次,每重复试虫10头,处理前称试虫体重,处理后每隔24 h称虫重,并换上新处理的甘蓝叶碟.不断观察试虫的生长状况,据此将试虫的生长发育状况分为5个等级:0级——受影响最严重,未取食,未化蛹,虫体变黑死亡;1级——受影响严重,取食少量,活动力不强,未化蛹而死亡;2级——受影响,取食不正常,未完全化蛹即死亡;3级——受影响较轻