硝酸还原酶活性的测定.docxVIP

实验二、 硝酸还原酶活性的测定?活体法 ［原理］: 硝酸还原酶（NR）是植物氮素同化的关键酶，它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸 盐，产生的亚硝酸盐与对-氨基苯磺酸（或对-氨基苯磺酰胺）及。-萘胺（或萘基乙烯胺）在 酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。 生成的红色偶氮化合物在540nm有最大吸收峰，可用分光光度法测定。硝酸还原酶活 性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以每克鲜重含氮量表示，即以ug.g-摇匀后在25度下保温30min，然后在540nm下比色测定。以亚硝态氮（ug）为横坐标（X），吸光值为 纵坐标（Y）建立回归方程。样品中硝酸还原酶活力测定 在取材的前一天加50mmol/L KNO3或NaNO 摇匀后在25度下保温30min，然后在540nm下比色测定。以亚硝态氮（ug）为横坐标（X），吸光值为 纵坐标（Y）建立回归方程。 样品中硝酸还原酶活力测定 在取材的前一天加50mmol/L KNO3或NaNO3到培养苗的水中就可以诱导酶的产生。 称取作物叶片0.5g （共3份，剪成1cm左右的小段（均匀），放入3只三角瓶中，其中 1份作对照，另外2份作酶活性测定用。 反应：先向对照三角瓶中加入 1ml30%三氯乙酸溶液，然后各三角瓶中都加入 9ml 0.1mol/LKNO3溶液，混匀后立即放入干燥器中，抽气30分钟（期间几次通入空气，再 抽真空，使叶片完全沉入瓶底，后在2