分子生物学学习资料：chapter5.docVIP

5.1用图来解释DNA电泳的原理。简要地说明150，600和1200个碱基对的DNA的相对迁移率。

答：电泳来分离DNA是利用了DNA本身带有负电，所以在电泳池中朝向正极移动。根据DNA碱基对的数目不同，即分子量的大小差异，小分子的DNA所受到的摩擦力相对小，于是电泳迁移率较快。大分子DNA会受到较大的摩擦，速率相对较慢。根据分子量的大小，就可以分离出不同大小的DNA片段：大分子DNA靠近顶端，小分子DNA靠近底部。最后，DNA用荧光染料染色，电泳结果既可显现。根据电泳结果和一个已知的Ladder比较（如图所示），即可以粗略得到片段大小。

在一定范围内(0~1000bp)，移动的距离和碱基对的数目基本呈正比。记移动距离为λ。故一般满足如下：λ150=4λ600。但是1200个碱基时，稍微偏离线性，但是偏差不大。故不严格追究应也有λ600=2λ1200。实际上前者略小于后者的两倍。

5.2一个特定的双链DNA片段在图5.2b所示电泳实验中迁移了30mm，估算其碱基对大小。

答：从图上可知片段长度大约为550个碱基对。

5.3请比较蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和二维电泳。

答：SDS可以分离不同分子质量的多肽，SDS有两个优点：首先它可以作为一种detergent去使subunits变性，这样subunits就不会互相结合在一起；其次，它可以使所有的peptides