第四章_中药制剂的含量测定.pptVIP

薄层荧光扫描法第三节常用定量分析方法薄层扫描法基本原理：F=KC光源：氙灯或汞灯。灵敏度：最低可测到10～50pg。适用范围：适合于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质的测定。Kubelka-Munk理论不适用于薄层荧光扫描，无需进行曲线校直。本文档共120页；当前第94页；编辑于星期六\12点59分第二节含量测定方法的验证线性(linearity)与范围(range)考察方法线性与范围可通过绘制标准曲线来确定。n应为5～7，用浓度c对峰高h或被测物的响应值之比进行回归处理，建立回归方程，r≥0.999确定样品浓度与峰面积/峰高是否呈线性关系确定线性的范围直线是否通过原点目的本文档共120页；当前第62页；编辑于星期六\12点59分qqμg)峰面积均值0.08106201.02885201.0119200.994900.24318605.17249609.8347614.496890.32424805.34619804.7837804.221250.486361211.549191211.23081210.912350.648481617.023321614.73281612.442380.810602006.691772006.55982006.42786第二节含量测定方法的验证线性(linearity)与范围(range)本文档共120页；当前第63页；编辑于星期六\12点59分对照品进样量（μg）0.09280.18560.27840.37120.464色谱峰面积126195238932366405482771603967Y=1292438.5776X+3839.1000r=0.9998样品进样量在0.0928～0.464μg范围内，淫羊藿苷峰面积与进样量呈现良好的线性关系。例：精密吸取淫羊藿苷对照品溶液(0.0464mg/ml)2、4、6、8、10μl注入液相色谱仪，按拟定的色谱条件进行测定，记录峰面积，测定结果下表。本文档共120页；当前第64页；编辑于星期六\12点59分指测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。如果条件要求苛刻，应在方法中写明第二节含量测定方法的验证耐用性（robustness）变动因素：测试液的稳定性、样品提取次数、时间液相色谱法：流动相的组成和pH值，不同厂牌或不同批号的同类色谱柱、柱温，流速等。GC法：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相，不同类型的担体及柱温、进样口和检测器温度等TLC法：吸附剂或薄层板的型号和厂牌，展开温度、湿度等本文档共120页；当前第65页；编辑于星期六\12点59分柱温变动的影响样品不同柱温条件下峰面积相对标准偏差%35℃25℃对照品535.3740(32h)541.07400.6892537.1292(32h)541.9327供试品883.9976(32h)889.91310.2190887.3354(32h)886.9148耐用性（robustness）第二节含量测定方法的验证本文档共120页；当前第66页；编辑于星期六\12点59分流动相组成比例变化的影响样品不同流动相组成条件下峰面积相对标准偏差%63:3755:45供试品885.8881（0h）863.01731.7307%886.3683（0h）866.3838耐用性（robustness）第二节含量测定方法的验证本文档共120页；当前第67页；编辑于星期六\12点59分色谱柱的影响样品不同色谱柱条件下峰面积相对标准偏差%色谱柱1色谱柱2对照品541.4097(40h)543.59810.3096542.4932(48h)545.0605供试品894.3388(40h)904.46230.4719898.0939(48h)899.9722耐用性（robustness）第二节含量测定方法的验证本文档共120页；当前第68页；编辑于星期六\12点59分流动相流速的影响样品不同流速条件下峰面积相对标准偏差%1.0ml/min*0.8ml/min对照品541.0740675.9177915.54541.9327674.57849供试品889.91311106.6318415.83886.91481118.04224供试品（μg/ml）44.3344.510.28