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肠杆菌科细菌碳青霉烯酶编码基因KPC-2传播机制研究的开题报告

一、研究背景

肠杆菌科细菌是常见的致病菌之一，而碳青霉烯酶是一种重要的耐药基因。KPC-2编码碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌已在全球范围内广泛传播，并引起了公共卫生上的一系列重要问题。因此，研究KPC-2编码基因在肠杆菌科细菌中的传播机制，将对肠杆菌科细菌的耐药性及公共卫生安全等方面产生重要的意义。

二、研究目的

本研究旨在探究KPC-2编码基因在肠杆菌科细菌中的传播机制，研究包括：1）KPC-2在肠杆菌科细菌中的表达情况及其对细菌耐药性的影响；2）KPC-2基因在肠杆菌科细菌中的传播途径以及传播机制；3）KPC-2编码基因在肠杆菌科细菌中的突变情况及其对细菌抗药性的影响。

三、研究方法

1）样本采集：收集来自不同环境及来源的肠杆菌科细菌样本，包括医院感染性菌株和环境中的菌株。

2）基因检测：根据已知序列设计KPC-2基因的引物，利用PCR方法对菌株进行检测。

3）表达分析：将KPC-2基因分别克隆到植物直线状病毒载体中，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株用以表达KPC-2。利用Westernblotting及RT-PCR等方法对其表达进行检测。

4）传播研究：检测菌株的多重耐药性，并通过横向传播实验研究KPC-2基因在肠杆菌科细菌中的传播机制。

5）突变、解释及模拟：利用突变分析和百度蛋白质数据库等方法对KPC-2基因的突变情况和细菌抗药性的影响进行研究，并进行分子动力学模拟分析。

四、预期结果

本研究将分析KPC-2编码基因在肠杆菌科细菌中的表达情况及其对细菌耐药性的影响，探究KPC-2基因在肠杆菌科细菌中的传播途径以及传播机制，揭示KPC-2基因在肠杆菌科细菌中的突变情况及其对细菌抗药性的影响。预计可为防控KPC-2耐药性菌株在临床应用上提供有价值的基础数据支持。