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利用噬菌体防治水稻抗白叶枯病技术体系的建立

水稻白叶枯病是一种严重的细菌保护病，威胁着中国的水稻生产。在华南、长江流域主要稻区,受害尤为严重,造成大面积水稻歉收[l]。虽然通过选育抗病品种来控制水稻白叶枯病,使水稻品种对白叶枯病的抗性有较大的提高,但是,抗性基因资源有限,所利用的基因单一,抗源过于集中,遗传变异狭窄则容易出现该病抗性的脆弱。另一方面,近一个世纪的研究尚未找到防治水稻白叶枯病经济有效的化学农药。在目前这种对水稻进行抗白叶枯病遗传改良和化学防治还面临巨大压力的情况下,本研究采用水稻白叶枯病的噬菌体抑制该病菌,实现省时省力和无污染的生物防治目的,既可以克服和延缓化学农药抗性、保持农田生态平衡,又可以克服菌群变异导致的抗性丧失,可望获得良好的经济、社会和生态的综合效益,同时也为其它作物细菌性病害的防治探索一条新途径。

1材料和方法

1.1pv.orygae型菌的制备

水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.OryzaeⅣ型菌,由华中农业大学土化系提供),活化两次后,生化培养箱中保持26℃培养,取2d龄菌苔,用蒸馏水稀释成浓度约为108个/ml的菌液,即配即用。

1.2半合成培养基

取1m1在液体培养基中培养的水稻白叶枯Ⅳ型菌菌液和1m1Ⅳ型菌的噬菌体液(浓度约1010噬菌斑/m1)于35ml液体马铃薯半合成培养基3中,(26±1)℃过夜震荡培养