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昆虫系统表达PDL1蛋白制备功能性单克隆抗体的开题报告

一、研究背景

PDL1（Programmeddeath-ligand1）蛋白是一种具有免疫抑制功能、广泛存在于多种肿瘤细胞表面的膜蛋白，其主要通过与PD-1（programmeddeath-1）蛋白结合，抑制机体的免疫应答，形成免疫逃逸的状态，从而促进肿瘤细胞的生长和扩散。因此，PDL1蛋白作为肿瘤免疫治疗的重要靶点，近年来引起了广泛的关注。其中，针对PDL1蛋白的单克隆抗体，是目前肿瘤免疫治疗中最具有前景的治疗手段之一。

然而，要制备功能性的PDL1单克隆抗体，关键在于获得高质量和高稳定性的PDL1蛋白，而目前获得的PDL1蛋白主要通过原核表达技术获得，存在蛋白质产量低、折叠不稳定等问题，影响了后续的单克隆抗体制备工作。为了解决这一问题，利用昆虫细胞作为表达宿主，制备高质量的PDL1蛋白，成为了当前最为热门的研究方向之一。

二、研究目的

本课题旨在通过利用昆虫系统表达PDL1蛋白，制备高质量、高稳定性的PDL1单克隆抗体，并探究其在肿瘤免疫治疗中的应用价值，为肿瘤治疗提供新的治疗手段和策略。

三、研究内容及方法

1.昆虫细胞系统表达PDL1蛋白：利用Bac-to-Bac系统将PDL1编码序列插入pFastBac1载体中，再将pFastBac1-PDL1载体导入SF9细胞中进行表达。优化表达条件，利用Westernb