原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
重组胶原蛋白医用敷料体外透皮吸收评价指南（荧光标记法）
1范围
本文件规定了重组胶原蛋白医用敷料体外透皮吸收试验方法的适用范围、术语和定义、试验原理、
试验用受试物的要求、试验方法、试验数据和报告。
本文件适用于重组胶原蛋白医用敷料用于非慢性浅表创面时所含重组胶原蛋白透皮吸收的评价。
本文件并非适用于检测所有的情况，仅适用于皮肤体外透皮的最初定性和定量评价。
医用敷料中常见的丝素蛋白、贻贝蛋白及其它蛋白类可参考本文件，但需要根据具体的产品特性进
行分析评价。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，
仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本
文件。
GB/T27818化学品皮肤吸收体外试验方法
YY/T1849重组胶原蛋白
中华人民共和国药典
皮肤外用化学仿制药研究技术指导原则（试行）
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
离体皮肤组织isolatedskintissue
从人或动物体表分离出的符合体外透皮吸收试验需要的皮肤组织，可直接用于试验，或经过一定创
面制备流程后用于体外透皮吸收试验。
创面wound
正常皮肤（组织）在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因
素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，
同时，皮肤的正常功能受损。
受试物testsubstance
经荧光标记的重组胶原蛋白，按终产品生产工艺制备成的重组胶原蛋白医用敷料。
1
待测物analytes
受试物中所含的荧光标记的重组胶原蛋白。
终产品finishedproduct
经受过所有加工过程处于“待上市”状态的医疗器械或医疗器械组件，其加工过程包括包装以及灭
菌（如适用）。
4试验原理
将重组胶原蛋白进行荧光标记后配置受试物，将离体猪皮制备创面后进行体外透皮吸收试验，用荧
光显微镜观察切片中荧光信号来定性和追踪重组胶原蛋白，同时使用酶标仪或荧光分光光度计对皮上、
皮中和皮下组织中的重组胶原蛋白进行定量分析，从而评价重组胶原蛋白是否透过创面皮肤。
5受试物和待测物要求
荧光标记
将荧光分子通过共价结合的方式标记到重组胶原蛋白上，推荐FITC（异硫氰酸荧光素，
Fluoresceinisothiocyanate）作为重组胶原蛋白荧光标记物。其它荧光标记物，如RBITC（异硫氰酸罗
丹明B，RhodamineBisothiocyanate）、Cy5（菁染料5，Cyanine-5）等也可用于重组胶原蛋白的荧光
标记。经过分离纯化获得的荧光标记的重组胶原蛋白应置于4℃避光保存，用于后续试验。若荧光标
记的重组胶原蛋白为液体，建议标记后两个月内用于后继试验；若荧光标记的重组胶原蛋白为冻干粉
末，建议标记后六个月内用于后续试验。
标记效果评价
应提供FITC标记前后全波段吸收峰扫描图谱（图1）和SDS（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝
胶电泳）或HPLC（高效液相色谱）等图谱，同时报告标记产物的荧光标记率。FITC标记的重组胶原蛋
白应在荧光素对应的激发波长处（495nm）左右有吸收峰。可选用紫外分光光度计、酶标仪等设备对荧
光标记前后的重组胶原蛋白进行全波段吸收峰扫描。
4未标记蛋白标记蛋白
3
值
D
O
收2
吸
1
0
150250350450550650
文档评论（0）