细菌的培养方法.ppt

关于细菌的培养方法第1页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三教学目标1.熟悉常用的纯种细菌的接种方法。2.掌握标本中细菌的分离培养技术。3.了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”。4.深刻认识“无菌操作”对于微生物实验及医药学实践的重要性。5．进一步理解“正常菌群”的概念。第2页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三实验主要内容1．录相：细菌的培养方法2．操作：⑴空气中细菌的检查（沉降法血平板1块/6人）⑵呼吸道细菌的检查（咽拭子法培养血平板1块/3人）⑶随身物品的细菌检查（手指消毒前后普通平板1块/3人）⑷细菌的接种法（液体、半固体、固体1套/3人）材料：⑴大肠埃希菌培养物（1支/6人）⑵碘酒、75%酒精、棉签等（1套/6人）第3页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三培养基的制备一、培养基（culturemedium）由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。第4页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三（一）培养基的类型及应用1、按用途划分1）基础培养基能满足一般细菌生长繁殖的营养需要，如肉汤（包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等）。2）营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、酵母浸膏等。第5页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三3）鉴别培养基4）选择培养基用于鉴别不同类型细菌的培养基。特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可将该种细菌与其他细菌区分开来。将某种细菌从混杂的细菌群体中分离出来的培养基。根据不同种类细菌的特殊营养需求，在培养基中加入相应的特殊营养物质；或者加入某些化学物质，抑制不需要的细菌生长，有利于所需细菌的生长。5）厌氧培养基第6页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三SS琼脂培养基（Salmonella-Shigellaagar）大肠埃希菌沙门菌志贺菌第7页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三2、根据物理状态划分液体培养基：增菌固体培养基（琼脂浓度为2－3％）：增菌，分离培养半固体培养基（琼脂浓度为0.2-0.5%）：动力检查，保种液体培养基固体培养基半固体培养基第8页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三（二）细菌生长繁殖的条件1．充足的营养物质；2．适宜的温度；3．合适的酸碱度（ph）；4．必要的气体环境；第9页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三温度嗜冷菌(10-15℃)嗜温菌（30-40℃）：绝大多数病原菌嗜热菌（50-85℃）第10页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三pH嗜中性菌（5to8）嗜酸性菌（below5.5）嗜碱性菌（above8.5）多数病原菌最适酸碱度为PH7.2-7.6霍乱弧菌耐碱PH8.4-9.2结核分支杆菌耐酸PH6.5-6.8第11页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三气体环境氧和二氧化碳按细菌对氧的需求可分为四种类型：（1）专性需氧菌（obligateaerobe,O220%）（2）兼性厌氧菌（facultativeanaerobe,O2:Yesorno）（3）微需氧菌（microaerophilicbacterium,O2:2~10%）（4）专性厌氧菌（obligateanaerobe,O2:No）某些细菌如奈瑟菌在培养时需要提供5-10%二氧化碳；第12页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三二、细菌在培养基中的生长现象1．固体培养单个微生物在适宜的固体培养基表面生长、繁殖到一定程度，可以形成肉眼可见的有一定形态结构的细菌集团，称为菌落（colony）。菌落特征是鉴别细菌的重要依据之一。第13页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三2液体培养表面生长沉淀生长混浊生长第14页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三3半固体培养常用于检查细菌动力无动力有动力第15页，讲稿共31页，2023年5月2日，星期三本次试验的操作：空气中细菌的检查（沉降法，血平板）呼吸道细菌的检查（咽拭子或咳碟培养，血平板）随身物品细菌检查（普通平板）细菌的接种法：液体、半固体、固体培养基第16