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无选择标记和无载体骨架序列的转反义ACS1基因河套蜜瓜耐贮藏品系选育的开题报告

一、研究背景：

蜜瓜是一种非常受欢迎的水果，其软肉和甜味使其成为夏季水果的首选。然而，由于蜜瓜的贮藏性能差，导致其在长途运输或贮藏过程中往往易受损坏。因此，针对蜜瓜的贮藏性能进行改进，对于提高蜜瓜的市场竞争力具有重要意义。

反义基因技术是一种通过反义RNA影响目标基因表达的方法，已经被广泛应用于植物基因工程领域。ACS1基因编码的蛋白质参与孕果酸合成，与蜜瓜的果实软化有关。因此，ACS1基因的降解可能会有助于蜜瓜的贮藏稳定性。

二、研究目的：

本研究旨在通过反义技术降解蜜瓜中的ACS1基因，选育出具有较强贮藏稳定性的蜜瓜品系。

三、研究内容：

1.构建反义ACS1基因植物表达载体

在基因组序列中找到蜜瓜ACS1基因序列，通过反向PCR方法获取反义ACS1基因序列。设计基因组扩增引物，扩增获得目的序列，并进行酶切连接，构建反义ACS1基因植物表达载体。

2.转化蜜瓜

采用农杆菌介导的方法将反义ACS1基因植物表达载体转化到蜜瓜品种中。

3.筛选转化株

通过PCR和Southernblot分析鉴定瞬时表达反义ACS1基因的蜜瓜转化株，并通过表型分析筛选出具有贮藏稳定性的蜜瓜品系。

四、研究意义：

本研究将通过反义技术降解蜜瓜中的ACS1基因，选育出具有较强贮藏稳定性的蜜瓜品系，可以提高蜜瓜在长途运输和贮藏过程中的抗性，从而提高蜜瓜的市场竞争力。此外，研究结果可以为蜜瓜育种和ACS基因家族相关研究提供参考。