CRISPR_Cas9编辑...因改良优质粳稻品种香味性状_吴明基.pdfVIP

福建农业学报

2020，35（5）：465−473

FujianJournalofAgriculturalSciencesdoi:

10.19303/j.issn.1008-0384.2020.05.001

吴明基，林艳，刘华清，等.

CRISPR/Cas9编辑Badh2基因改良优质粳稻品种香味性状

[J].

福建农业学报，2020，35（5）：465−473.

WU

M

J,

LIN

Y,

LIU

H

Q,

et

al.

Development

of

Fragrant

JaponicaRice

by

CRISPR/Cas9-targeted

Editing

on

Badh2

[J].

FujianJournalof

AgriculturalSciences，2020，35（5）：465−473.

CRISPR/Cas9编辑Badh2基因改良优质粳稻

品种香味性状

*

吴明基，林

艳，刘华清，付艳萍，宋亚娜，王

锋

（福建省农业科学院生物技术研究所/福建省农业遗传工程重点实验室，

福建福州350003）

摘

要：【目的】

利用基因编辑技术编辑水稻香味基因，改良优质粳稻香味性状。【方法】

构建CRISPR/Cas9-

BADH基因编辑载体，转化优质粳稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134，测序鉴定3个优质粳稻品种的香味基因

Betainealdehydedehydrogenase2（Badh2）突变体并分析潜在脱靶效应，利用气相色谱-质谱联用技术测定不同遗传背

景badh2突变体稻米的2-乙酰-1-吡咯啉（2-acetyl-1-pyrroline,

2AP）含量。【结果】

转化获得的30株T代中有24株

0

为badh2突变体，其中53.33%为杂合型突变，16.67%为纯合型突变，10%为双等位突变类型。T代非转基因植株

1

内共鉴定获得7种纯合badh2突变基因型。在5个预测位置上未检测到脱靶事件的发生，说明设计的sgRNA具有高

度特异性。所有Badh2移码突变体稻米的2AP含量都达到或高于稻花香的水平，但不同品种来源的badh2突变体间

2AP含量差异极显著。【结论】

本研究提供了一个能够高效诱导水稻Badh2突变的CRISPR/Cas9定向编辑靶点，改

良了生产上大面积推广的3个优质水稻品种龙稻18、龙稻24和秀水134的香味性状，发现了不同遗传背景的水稻