生物化学实验实验二-cam电泳 凝胶层析 (2)课件.pptVIP

实验报告要求：1、把薄膜粘在实验报告上，2、标出每条条带的名称*今天我们用的凝胶是葡聚糖凝胶*大分子直径直径大于凝胶网孔，不能进入凝胶内部，只能顺着胶粒的间隙移动，所以流程短、流速快，首先流出层析柱；小分子物质直径小于网孔，能自由出入凝胶网孔，因而流程长，流速慢，最后流出层析柱。我们把这个现象叫做分子筛效应，在今后的实验中也会涉及。*我们要分离的样品是血红蛋白和DNP-胰糜蛋白酶，其性质如下*我们接下来看一下实验步骤，并仔细观察老师的示教。教师一边讲解实验步骤一边操作。2、打开出口，往柱中加入蒸馏水，仔细观察砂芯底部是否有气泡，若有气泡，用手轻轻地弹柱的底部排除气泡，待柱内液体留有约5ml时，关闭出口，加入凝胶（注意：在加入凝胶之前，我们先把凝胶上面的水稍微掉一些，轻轻搅匀，千万不能使劲的搅，要不然凝胶很容易损坏，实验结果就不明显），打开出口，调节流速，时凝胶均匀沉降，直到凝胶积层达到15-20cm，注意保持胶面上有水*回收凝胶时用洗耳球把层析柱的凝胶吹到小烧杯中*实验14：血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳实验13：凝胶柱层析分离血红

蛋白和DNP-胰糜蛋白酶生物化学与分子生物学系实验14血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳P58一、目的与要求：了解电泳的原理、练习乙酸纤维素薄膜电泳技术。电泳影响电泳的因素待分离大分子的性质：所带的电荷、分子大