细菌耐药性监测与临床.ppt

ESBLs的发现和流行情况

产生基础最常见的由质粒介导的β内酰胺酶是TEM-1，TEM-2和SHV-1酶，这些酶仅对第一代头孢菌素有弱水解活性（广谱酶）。80年代中期，由于临床上广泛使用头孢类抗生素尤其是头孢他啶和头孢曲松，导致TEM-1和SHV-1β内酰胺酶突变酶的出现。首次发现1982年，英国1983年，德国目前状况肺炎克雷伯菌是产生ESBL的最常见菌，产酶可高达40%以上，我院2007年肺炎克雷伯菌产ESBL达37%—38%，大肠产酶达40%，肠杆科其他菌如产酸克雷伯菌、大肠埃希菌、奇异变形杆菌中也可分离到ESBL。第22页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三肠杆科细菌产ESBLs概况TEM-1最普遍,典型的情况是TEM-型和SHV-型的ESBLs由大的多重耐药质粒编码ESBLs类型多且都有自己特异的底物和酶活性，是针对不同类型的广谱β内酰胺类抗生素或β内酰胺酶抑制剂产生的耐药,迄今已发现有上百种类型的ESBLs肠杆科细菌大多都具产酶能力.第23页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三ESBLs流行特点1、世界范围流行，但有区域性2、确切的流行情况不清楚（耐药表型不明确，有不均一表现）3、主要见于医院感染4、ESBLs的编码基因在质粒上，易造成在不同菌株中的播散，5、对酶抑制剂敏感；对EDTA不敏感；第24页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三ESBLs的耐药机制基因突变耐药基因由质粒携带ESBLs多由普通的β内酰胺酶基因发生突变而来。Gly→Ser-238突变引起酶的活性区扩大，导致对氧化亚氨基头孢菌素的亲和力和水解活性升高，体外诱变也证实第168和238位的置换可增强对氧化亚氨基β内酰胺类抗生素的水解活性。第25页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三★ESBLs耐药特点1、青霉素类、一、二、三代头孢菌素、（部分可水解四代）和单环酰类抗生素均耐药2、对碳青霉烯类和头霉素类敏感3、对酶抑制剂敏感4、产生ESBLs的细菌往往多重耐药。其质粒上常有氨基糖苷类、氯霉素或TMP-SMZ等的耐药基因。（例有统计产酶株AMK70.37%耐药、CIP75.30%耐药；不产酶株分别为13.20%、35.81%）第26页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三产ESBLs细菌感染的临床表现1、临床表现难以治愈的感染或反复复发的感染。2、三代头孢菌素治疗临床无效。第27页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三ESBLs表型的检测筛选试验标准纸片琼脂扩散法MIC肉汤稀释法检测双纸片协同试验确认试验纸片确认试验MIC肉汤稀释法仪器E-testPCR检测第28页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三第29页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三第30页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三标准纸片琼脂扩散法

培养基：Muller-Hinton琼脂药敏纸片头孢泊肟(10ug/片)、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和氨曲南（均为30ug/片）中至少二种：接种方法标准纸片扩散法孵育条件、时间：35℃、空气、16—18小时第31页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三标准纸片琼脂扩散法

判断标准：头孢泊肟的抑菌环直径≤17mm头孢他啶的抑菌环直径≤22mm头孢曲松抑菌环直径≤25mm孢噻肟和氨曲南抑菌环直径≤27mm有一种药敏纸片结果在此范围均应高度怀疑为产ESBLs株应进一步做确认试验，报告方式：疑似产ESBLs株，所有的青霉素类、头孢菌素类（包括三、四代头孢）单环酰胺类均视为耐药；方法的局限性易漏检

第32页，讲稿共71页，2023年5月2日，星期三常规药敏试验：细菌对药物MIC/直径往往可能落在敏感范围，所以