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CyclinE/Cdk2底物Ankrd17的鉴定及功能分析的开题报告

一、研究背景和意义

CyclinE/Cdk2是调控细胞周期进程的关键蛋白激酶，具有重要的生物学功能。CyclinE与Cdk2的结合形成复合物，在S期开始时，启动核苷酸合成、DNA复制等关键生物合成活动的进行，从而推进细胞周期的进程。CyclinE/Cdk2参与了多个信号途径，并通过调控底物的磷酸化修饰，影响信号级联反应导致的各种细胞过程。

Ankrd17是一种新发现的调节细胞周期的蛋白激酶底物，其调节机制和生物学功能目前尚未明确。因此，本研究旨在对CyclinE/Cdk2底物Ankrd17进行鉴定及功能分析，探究其在细胞周期调控中的调控作用和机制，这对于深入了解细胞周期的调控机制，为研究细胞增殖、分化等相关生物学问题提供理论基础。

二、研究方法和步骤

(1)Westernblotting鉴定Ankrd17的表达及CyclinE/Cdk2对Ankrd17的磷酸化修饰作用

通过Westernblotting方法检测Ankrd17在细胞中的表达情况，并验证CyclinE/Cdk2对Ankrd17的磷酸化修饰作用。

(2)Co-immunoprecipitation鉴定Ankrd17和CyclinE/Cdk2之间的相互作用

通过共免疫沉淀实验鉴定Ankrd17和CyclinE/Cdk2之间的相互作用，确定其是否为CyclinE/Cdk2底物。

(3)鉴定Ankrd17的功能及调控机制

构建Ankrd17基因敲除和突变的细胞株，观察其对细胞生长、增殖、周期分布等指标的影响，并分析其调控机制。

三、预期结果和意义

(1)成功鉴定Ankrd17为CyclinE/Cdk2的底物，阐明Ankrd17在细胞周期调控中的作用和调控机制。

(2)构建Ankrd17敲除和突变的细胞株，揭示Ankrd17的生物学功能和在细胞周期调控中的作用机制，为研究细胞增殖、分化等相关生物学问题提供理论基础。