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一.选择题(在备选答案中选择一个最佳答案,每题2分,共20分):
1.在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是()A.中和核酸的负
离子,使其易于沉淀B.调节PH值C.保持核算的完整性D.提高核酸的浓
度E.无特定目的
2.在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,则A所占摩尔比为
()A.82.8%B.32.8%C.17.2%D.65.6%E.无法计算3.下列那项不是扩增反应
所必需的?()
A.引物和模板B.dNTPC.Mg++D.DNaseE.缓冲液4.下列那项是分子生物学技术形
成的理论基础?()
A.基因结构与功能的关系B.基因结构变异与疾病的关系C.病原微生物的基因结
构特征D.基因的表达.调控与疾病的关系E.以上皆是
5.分子生物学检验技术主要包括那些技术?()A.核酸分子杂交技术B.DNA测
序技术C.PCR技术D.DNA重组技术E.以上全是
6.下列哪项检测需应用分子生物学检验技术?()A.肝功能检测B.乙肝两对
半检测C.乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测D.肿瘤细胞培养E.病原微生物培养
7.在核酸的分离纯化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取()A.尽量简化分离步骤,
缩短提取时间B.适当延长提取时间
C.在37摄氏度条件下进行D.加入Mg++,Ca++等二价金属离子E.以上全是
8.有一核酸样品,测得A260/A280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品?
()A.DNAB.RNA
C.是DNA,但有蛋白质污染D.是RNA,但有蛋白质污染E.DNA和RNA
9.在RNA提取和纯化过程中,为避免Rnase污染而导致RNA的降解,应采取()A.在洁净
的实验室里操作B.带手套和口罩C.所用器材高压消毒或DEPC处理D.冰浴
下操作E.以上皆是
10.随机引物标记法全程标记DNA时,需选用下列哪种酶?()A.DNA多聚酶I的Kelnow
片段B.TaqDNA聚合酶C.限制性内切酶D.DNA连接酶E.末端转移
酶
二.判断题:(你认为下列叙述正确的请在题后括号内打√,错误的打×,每题2分,共6
分)1.双脱氧核酸链终止法是最常用的DNA测序技术()
2.TapDNA聚合酶的作用是催化DNA合成,但由于缺乏3’→5’外切酶活性,无校正功能,
所以在复制合成新链过程中可能会发生碱基错配,导致PCR产物的错误()3.采用加热
煮沸法可使RNase完全失活()三:填空题(每空格2分,共24分):
1.在选择核酸的分离纯化方法,应遵循的总原则是:一是保证核酸(一级结构的完整性);
二是尽可能(排除其他分子的污染,保证核酸样品的纯度)。
2.在PCR反应中,Mg++是个至关重要的因素,浓度(过低)会降低酶的活性,浓度
(过高)又会导致非特异性扩增。
3.用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是(本底低),因而最容易检测杂交信号,
缺点是(脆性大)易破裂,且队<500bp的核酸结合力低。
4.整个核酸杂交反应主要由(预杂交)、(杂交)和(洗脱)三个步骤组成。
5.转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸,其与滤膜的结合是松散的,需做进一步的固定,
常用的固定方法是(烘烤)、(紫外线固定)和(碱固定)。三.名词解释:(每题4分,共20
分):
1.融点曲线分析技术:是根据野生型序列和突变序列因不同Tm而产生不同的融点曲线而设
计的。
2.探针:指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用,并可以被检测的分子。
3.Tm值:DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。
4.转染:将外源DNA直接导入真核生物细胞的过程称为转染。
5.转化:将重组的DNA分子导入细菌,使其在细菌体内扩增及表达的过程称为转
化。四.问答题:(每题10分,共30分)
1.简述限制性内切酶的定义、命
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