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临床分子生物学检验学技术

【名词解释】

基因组：是一个细胞或一种生物体的整套遗传物质，包括基因和非编码DNA。

单核甘酸多态性(SNP)：主要是指在基因组水平上由单个核甘酸的变异所引起的

DNA序列多态性。

动态突变(dynamicmutation)：某些单基因遗传病，是由于DNA分子中某些短串

联重复序列，尤其是基因编码序列或侧翼序列的三核甘酸重复次数增加所引起，

因这种三核甘酸的重复次数可随着世代交替的传递而呈现逐代递增的累加突变

效应，所以被称为动态突变。

限制性片段长度多态性(RFLP):是根据不同个体基因组的限制性内切酶的酶切位

点的碱基发生突变，或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失，导致酶切片段大

小发生了变化，这种变化可以通过特定探针杂交进行检测，从而可比较不同个体

DNA水平的差异，即多态性。

变性(denaturation)：待扩增的靶DNA片段在高于其熔点温度Tm的条件下，DNA

双螺旋结构中的氢键断裂而解螺旋，形成两条单链分子，这两条单链分子即为扩

增反应的模板。

内含子(intron)：断裂基因中不编码的间隔序列称为内含子，内含子是在mRNA被

转录后的剪接加工中去除的区域。

外显子(exon)：断裂基因中编码的序列称为外显子，即基因中对应于mRNA序列

的区域。

核酸探针：在核酸分子杂交实验中，杂交体必须和单链核酸分子区分开，为此需

要对参与杂交反应的核酸分子进行标记，这一段被标记的核酸分子就是探针。

核酸分子杂交：单链的核酸分子在合适的条件下，与具有碱基互补序列的异源核

酸形成双链杂交体的过程称作核酸分子杂交。

DNA芯片：通过微阵列技术，将大量已知序列的寡核甘酸片段或基因片段作为探

针，有序的、高密度的排列固定于支持物上，然后与荧光标记的待测生物样品中

的靶核酸分子，根据碱基配对的原则进行杂交，通过检测分析杂交信号的强度及

分布，对基因序列及功能进行大规模、高通量的研究。

蛋白质芯片：又称蛋白质微阵列，是将蛋白质或多肽固定在固相载体表面形成微

阵列，以获得蛋白质的表达、结构、功能和相互作用的信息。

生物芯片：将大量探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通过

检测每个探针分子的杂交信号强度，进而获取样品分子的数量和序列信息。

原癌基因：指普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因，其在生物进

化过程中高度稳定，对细胞无害，而且在控制细胞生长和分化中起重要作用。

抑癌基因（anti-oncogene）：为一类可以编码对肿瘤形成起阻抑作用的蛋白质的

基因，正常情况下抑制细胞增殖，促进细胞分化。

最佳条件下的变异（OCV）：是指在某一实验室内，在最理想和最恒定的条件下，

对同一质控品进行重复测定，所得出的最低变异，代表该检测项目在该实验室能

达到的精密度的最高水平。

常规条件下的变异（RCV）：是指在某一实验室内常规条件下，对同一质控品进行

重复测定（至少20次）所得出的变异，反映常规条件下该项目检测的精密度水平。

单基因遗传病：由于一对同源染色体上的单个基因或一对等位基因发生突变所引

起的疾病。

线粒体疾病：一组少见的因mtDNA变异而导致线粒体结构和功能异常、细胞呼吸

链及能量代谢障碍所致的以脑和肌肉受累为主的多系统疾病。

肽质量指纹图谱：是对蛋白质特异性酶解的多肽混合物进行质谱分析的方法，由

于不同蛋白质具有不同的氨基酸序列，被特异性的蛋白酶酶解的肽段具有不同的

肽段质量图谱，呈现独特的指纹特征。

全基因组关联分析（GAWS）：是指在人类全基因组范围内找出存在的序列变异，

即单核甘酸多态性，从中筛选出与疾病相关的位点。

熔点曲线分析：根据野生序列和突变序列的Tm值不同，产生的熔点曲线不同的特

点设计的一种检测核酸突变和多态性的技术。

多重PCR：在同一反应体系中加入多对引物，同时扩增一份DNA样品中同一靶DNA

或不同靶DNA的多个不同序列片段。

巢式PCR：是对靶DNA进行二次扩增，第2次扩增所用的模板为第1次扩增的产

物。（通常设计两对引物）

循环数（Ct值）：PCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的荧光阈值所

经过的循环次数。

【填空题】

1.在选择核酸的分离纯化方法，应遵循的总原则是:一是保证核酸（一级结构的

完整性）；二是尽可能（排除其他分子的污染，保证核酸样品的纯度）。

2.在PCR反应中，Mg++是个至关重要的因素，浓度（过低）会降低酶的活性，浓

度（过高）又会导致非特异性扩增。

3.