微生物次级代谢及调节.pptVIP

第1页，课件共40页，创作于2023年2月内容：青霉素的生物合成途径及代谢调节选育青霉素产生菌发酵控制第2页，课件共40页，创作于2023年2月青霉素的化学结构式：青霉素有一个四氢噻唑环和内酰胺环。R代表侧链，不同类型的青霉素含有不同类型的侧链。用不同的菌种或培养条件不同，可以得到各种不同类型的青霉素，或同时产生几种不同类型的青霉素。青霉素简介：四氢噻唑环内酰胺环侧链6-APA（6-氨基青霉烷酸）第3页，课件共40页，创作于2023年2月第4页，课件共40页，创作于2023年2月历史：1928年弗莱明发现点青霉产生可以杀死葡萄糖球菌的物质，称之为青霉素。1940年牛津大学的H.W.Flory和Chain获得较为纯净的青霉素，杀菌效果极佳。1943～45年间，发展成了新的一个工业部门：抗生素发酵工业1945年，对青霉素发现做出重要贡献的弗莱明、弗洛里、钱恩分享了诺贝尔医学和生理学奖。第5页，课件共40页，创作于2023年2月一青霉素的生物合成途径及代谢调节

第6页，课件共40页，创作于2023年2月青霉素的生物合成途径酰基转移酶酰化酶青霉素G6-APAACV合成酶IPN合成酶第7页，课件共40页，创作于2023年2月青霉素合成的调节方式：1碳分解代谢产物的影响2赖氨酸的反馈调节3氮调控4磷酸盐调控5硫调控第8页，课件共40页，创作于2023年2月1碳分解代谢产物的影响青霉素的生物合成受碳分解代谢产物阻遏，如ACV合成酶，IPN合成酶，酰基转移酶就被阻遏。葡萄糖可以刺激菌体生长，使作为Lys和青霉素合成中间体的α-氨基己二酸转向合成Lys，抑制青霉素的合成。第9页，课件共40页，创作于2023年2月α-酮戊二酸+乙酰CoA高柠檬酸顺-高乌头酸高异柠檬酸α-氨基己二酸σ-腺苷-α-AAA赖氨酸L-α-AAA-L-半胱氨酸异青霉素N青霉素G产黄青霉赖氨酸和青霉素的生物合成途径高柠檬酸合成酶第10页，课件共40页，创作于2023年2月葡萄糖降低青霉素生物合成的速率和得率还由于葡萄糖与6-APA之间形成复合物，从而减少了可用于合成青霉素的中间产物。葡萄糖有利于菌的生长，但抑制青霉素的合成，而乳糖虽被缓慢利用，却是产生青霉素的最好碳源。碳源的缓慢利用是大量合成青霉素的关键。第11页，课件共40页，创作于2023年2月2赖氨酸的反馈调节α-氨基己二酸的初级代谢产物是赖氨酸，分枝次级代谢产物是青霉素。赖氨酸能抑制青霉素的合成，α-氨基己二酸能逆转这种抑制。赖氨酸能反馈抑制高柠檬酸合成酶，导致α-氨基己二酸合成受阻，因而减少青霉素的合成。第12页，课件共40页，创作于2023年2月α-酮戊二酸+乙酰CoA高柠檬酸顺-高乌头酸高异柠檬酸α-氨基己二酸σ-腺苷-α-AAA赖氨酸L-α-AAA-L-半胱氨酸异青霉素N青霉素G产黄青霉赖氨酸和青霉素的生物合成途径高柠檬酸合成酶第13页，课件共40页，创作于2023年2月3氮调控产黄青霉生物合成青霉素能高浓度的铵离子抑制，这种抑制与谷胺酰胺合成酶有关：NH4+↗，谷氨酸浓度↗，青霉素↘。NH4+还能直接阻遏产黄青霉的青霉素合成基因的表达。如：乳糖培养的产黄青霉菌加入40mmol/LNH4Cl，ACV合成酶和IPN合成酶的基因受到阻遏，这种阻遏通过氮调控蛋白介导，它能结合到启动子区影响其表达。第14页，课件共40页，创作于2023年2月4磷酸盐调控磷酸盐可强化产黄青霉的葡萄糖阻遏，其本身对青霉素的合成没有明显影响。第15页，课件共40页，创作于2023年2月5.硫调控硫酸盐作为前体氨基酸半胱氨酸合成酶原料，在青霉素合成中起着重要作用。高浓度的硫酸盐阻遏低产产黄青霉菌株的硫酸盐通透酶而影响摄取，在硫酸盐饥饿时，该酶活性及硫酸盐摄取率上升。高产产黄青霉菌株呈现脱阻遏现象，即使在较高的硫酸盐浓度下仍具有较高的通透酶活性。第16页，课件共40页，创作于2023年2月二选育青霉素生产菌1出发菌株的选择2切断支路代谢3解除菌体自身的反馈调节4增加前体物的合成5选育形态突变株6其他标记第17页，课件共40页，创作于2023年2月

1出发菌株的选择

产生菌：点青霉菌（表面培养只有几十个单位）和产黄青霉菌（适合深层培养），以产黄青霉菌经过X射线，紫外诱变筛选到51-20号菌常用。●形成绿色孢子和黄色孢子的两种产黄青霉菌●深层培养中菌丝形态为球状和丝状两种，我国生产上大多数生产厂都采用绿孢子丝状菌。第18页