实验体外重组.pptVIP

关于实验体外重组第1页，课件共25页，创作于2023年2月实验目的与要求掌握体外DNA的重组过程；学习外源DNA分子经限制性内切酶切割后与载体的连接及转化过程；学习对DNA重组子的筛选方法。第2页，课件共25页，创作于2023年2月实验原理实验材料实验步骤预期结果注意事项第3页，课件共25页，创作于2023年2月一、实验原理1、DNA重组简介2、DNA连接酶3、TA克隆4、蓝白筛选第4页，课件共25页，创作于2023年2月DNA重组是外源DNA与载体分子的连接，重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下，有Mg2＋、ATP存在的连接缓冲系统中，将经过酶切的或脱磷酸处理的载体分子与外源DNA分子进行连接。这样经过重新组合的DNA叫做重组体或重组子。1、DNA重组简介第5页，课件共25页，创作于2023年2月DNA重组包括如下步骤：外源DNA片段的制备；载体的选择；DNA片段与载体连接；导入宿主细胞。第6页，课件共25页，创作于2023年2月第7页，课件共25页，创作于2023年2月第8页，课件共25页，创作于2023年2月2种连接酶——T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。（1）大肠杆菌DNA连接酶仅能连接具有相同粘性末端的两个DNA分子。2、DNA连接酶第9