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生物制药知识点总结

名词解释：

1.生物技术药物：采用DNA重组技术或其他生物新技术研制的

蛋白质或核酸类药物。

2.干扰素：人体细胞分泌的一种具有广泛抗病毒，抗肿瘤和免疫

调节活性的活性蛋白质。

3.高密度发酵：是应用一定的培养技术和设备来提高菌体生物量

和目标产物时空产率的发酵技术。是指培养液中工程菌的菌体浓度在

50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200gDCW/L.

4.植物细胞全能性：指植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗

传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。

5.细胞分化：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，

在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程。

6.脱分化：已分化的细胞在一定因素作用下恢复细胞分裂能力,

失去原有分化状态的过程。

7.继代培养：由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一段

时间而称之为第一代培养。连续多代培养即为继代培养。

8.固定化酶：是指经过物理或化学方法处理，使酶变成不易随水

流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。

9.抗体酶：具催化能力的免疫球蛋白，具有典型的酶反应特性。

10.发酵工程：利用微生物制造工业原料与工业产品提供服务的

技术。

简答题

1.生物技术制药的特征：

1）高技术2）高投入3）长周期4）高风险5）高收益

2.利用基因工程技术生产药品的优点：

1）利用基因工程技术可大量生产过去难以获得的生理活性蛋白

和多肽，为临床使用建立有效的保障

2）可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和

结构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围

3）利用基因工程可以发掘更多内源性生理活性物质

4）内源性活性物质在作为药物使用时，存在不足之处，可以通

过基因工程和蛋白质工程对其改造

5）利用基因工程技术可获得新型化合物，扩大药物筛选来源

3.利用基因工程生产药物的基本过程：

①目的基因的克隆，②构造DNA重组体，③构造工程菌，④目

的基因的表达，⑤外源基因表达产物的分离纯化产品的检验

4.反转录法获得目的基因的过程：

1）mRNA纯化2）cDNA第一链的合成3）cDNA第二链的合成

4）cDNA克隆5）将重组体导入宿主细胞6）cDNA文库的鉴定

7)目的cDNA克隆的分离与鉴定

5.影响基因工程菌的因素，如何控制：

1）培养基：需要对基质中营养物质的配比进行优化，以满足细

菌大量繁殖和外源蛋白表达的需要。

2）接种量：影响发酵产量和周期。

3）溶解氧：菌体扩增及外源基因的表达都需要大量氧进行呼吸

作用供能。

4）pH：影响细胞的生长和基因产物的表达。

5）温度：影响酶的反应速度，改变菌体代谢产物的反应方向，

影响代谢调控机制。

6）诱导时机：一般在对数生长后期升温诱导表达。

7）代谢副产物：会抑制菌体的生长和蛋白的表达。

6.基因工程菌分离纯化的色谱分离法：

方法有离子交换色谱、疏水色谱、反相色谱、亲和色谱、凝胶过

滤色谱及高压液相色谱。

（1）离子交换色谱IEC：是以离子交换剂为固定相，依据流动

相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大

小的差别而进行分离的一种层析方法。

（2）疏水层析HIC：是利用蛋白质表面的疏水区与固定相上疏

水性基团相互作用力的差异，对蛋白质组进行分离的层析方法。

（3）亲和层析AC：是利用固定化配体与目的蛋白质之间的非常

特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改

变条件可以使这种结合解除。

凝胶过滤层析：以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液

中各组分进行分离的液相层析方法。

7.提高质粒稳定性的办法：

1）选择合适的宿主菌2）选择合适的载体3）选择压力如抗生素

4）分阶段控制培养5）控制培养条件6）固定化

8.动物细胞生理特点:

1）细胞的分裂周期长

2）细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象

接触抑制又称为密度抑制是指当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇

合