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外消旋布洛芬酶法拆分的研究的中期报告
这里是关于外消旋布洛芬酶法拆分研究的中期报告:
研究目标:
本研究旨在利用外消旋布洛芬酶法将R,S-布洛芬拆分为两种单一对映异构体,并比较这两种异构体的生物活性。
研究方法:
1.外消旋布洛芬酶的表达与纯化
我们在E.coli表达系统中表达了一种能够选择性地水解R-或S-布洛芬的外消旋布洛芬酶,并对其进行了纯化。
2.外消旋布洛芬酶对R,S-布洛芬的拆分实验
我们利用外消旋布洛芬酶对R,S-布洛芬进行了拆分实验,并分别得到了R-布洛芬和S-布洛芬两种单一对映异构体。
3.对两种单一对映异构体的纯化和表征
我们对得到的R-布洛芬和S-布洛芬进行了纯化,并使用质谱和核磁共振等手段进行表征。
4.对两种单一对映异构体的活性比较实验
我们将得到的两种单一对映异构体进行了生物活性比较实验,包括对COX-1和COX-2酶的活性、白细胞迁移抑制活性、消炎镇痛作用等进一步研究。
研究进展:
目前,在上述实验中,我们已经成功地表达和纯化了外消旋布洛芬酶,并利用其成功地将R,S-布洛芬拆分为R-布洛芬和S-布洛芬两种单一对映异构体。通过质谱和核磁共振等手段,我们对这两种异构体进行了表征,并开始进行生物活性比较实验。
在生物活性比较实验中,我们发现R-布洛芬和S-布洛芬两种异构体具有不同的生物活性,R-布洛芬对COX-1酶和COX-2酶的抑制能力较强,而S-布洛芬对白细胞迁移的抑制作用则较为明显。
下一步的研究计划:
下一步,我们将继续进行生物活性比较实验,包括对两种异构体的消炎镇痛作用等方面进一步研究。同时,我们也将尝试优化外消旋布洛芬酶的表达和纯化条件,以提高对R,S-布洛芬的拆分效率,并提高两种异构体的产量。
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