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生物制药技术重点归纳

第一章

生物技术：（Biotechnology）是人类对生物资源（包括微生物、

植物、动物）的利用、改造并为人类服务的技术。

生物技术制药：就是利用基因工程技术、细胞工程技术、微生物

工程技术、酶工程技术、蛋白质工程技术、分子生物学技术等来研究

和开发药物，用来诊断、治疗和预防疾病的发生。

第二章

基因工程技术：基因工程技术又叫基因拼接技术或DNA重组技术。

将重组对象的目的基因插入载体，拼接后转入新的宿主细胞，构建成

工程菌；实现遗传物质的重新组合，并使目的基因在工程菌内进行复

制和表达的技术。

补料分批培养：补料分批培养是将种子接入发酵反应器中进行培

养，经过一段时间，间歇或连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生

长的培养方法。

连续培养：连续培养是将种子接入发酵反应器中，搅拌培养至菌

体浓度达到一定程度后，开动进料和出料蠕动泵，以一定稀释率进行

不间断培养。

透析培养技术：透析培养技术是利用膜的半透性原理使培养物和

培养基分离，其主要目的是通过去除培养液中的代谢产物来解除其对

生产菌的不利影响。

高密度发酵：是指培养液中菌体的浓度在50gDCW/L以上，目的

是降低成本，提高效率。

离子交换层析：是依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离

子进行可逆交换时结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。

疏水层析：是利用蛋白质表面的疏水区域和固定相上疏水基团之

间的相互作用力差异，对蛋白组分进行分离的层析方法。

亲和层析：是利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物

亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以

使结合解除。

凝胶过滤层析：是以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶

液中各组分进行分离的液相层析方法。

利用基因工程技术生产药物的优点？

答：1大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽，为临床使用

提供有效的保障；

2、可以提供足够数量的生理活性物质，以便对其生理、生化和结

构进行深入的研究，从而扩大这些物质的应用范围；

3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质；

4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处，可通过

基因工程和蛋白质工程进行改造和去除；

5、可获得新型化合物，扩大药物筛选来源。

基因工程药物制造的主要步骤？

答：目的基因的克隆；构建DNA重组体；将DNA重组体转移入

宿主菌构建工程菌；工程菌的发酵；外源基因表达产物的分离纯化；

产品的检验等。

化学合成目的基因的先决条件？

答：较小的蛋白质或多肽的编码基因可以采用人工化学合成，其

先决条件：已知目的基因的核苷酸序列或蛋白质的氨基酸序列，按相

应的密码子推导出DNA的碱基序列。

人工合成基因的限制有哪些？

答：1、不能合成太长的基因，50~60个碱基对；

2、人工合成碱基对时，遗传密码的简并会为选择密码带来很大的

困难：

3、费用高。

基因工程宿主菌应满足那些要求？目前应用最广泛的宿主菌有哪

些？

答：1、容易获得较高浓度的细胞；2能利用廉价易得的原料；3、

不致病、不产生内毒素；4、发热量低，需氧低，适当的发酵温度和细

胞形态；5、容易进行代谢调控；6、容易进行DNA重组技术操作；7、

产物的产量、产率高，产物容易提取。

宿主菌可分两大类：1、原核细胞：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链

霉菌；

2、真核细胞：酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。

表达载体须具备哪些条件？常用载体有哪些？

答：1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。

2、具多个限制酶切点，但每种切口最好只有1个，以便与外源基

因连接。

3、具有某些标记基因，便于进行筛选。

4、所产生的mRNA必须有翻译的起始信号。

5、具有很强的启动子。

6、有很强的终止子。

常用载体有：1、细菌细胞的质粒。2、λ噬菌体载体。

真核基因在大