SN∕T 5173-2021 国境口岸蜱传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法.pdf

ICS11.020

ccsc62

s

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SNIT5173-2卫1

国境口岸蝉传腹地病毒

实时荧光RT-PCR检测方法

Real-timeRT-PCRmethodfordetectingHeartlandVirusinticksatfrontier

ports

2021-06-18发布2022-01-01实施

中华人民共和国海关总署发布

SNff5173-2021

前言

本文件按照GB厅1.1-2020《标准化工作导则第1部分标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国合肥海关、中华人民共和国重庆

海关、中华人民共和国扬州海关、中华人民共和国广州海关。

本文件主要起草人：:XIJ丽娟、石泉、骆星丹、玉春、张晓龙、王静、慈颖、杨宇、郭夭宇、戴俊。

I

SNff5173-2021

国境口岸蝇传腹地病毒

实时荧光RT-PCR检测方法

1范围

本文件规定了国境口岸蝉传腹地病毒实时荧光RT-PCR检测方法，包括样本前处理、检测程序、

方法、结果判定及报告。

本文件适用于检验检疫机构对人及蝉携带腹地病毒的核酸检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）租

用于本文件。

GB19489实验室生物安全通用要求

SN厅1293国境口岸蝉类监测规程

ws厅230I临床诊断中聚合酶链反应（PCR）技术的应用

人间传染的病原微生物名录（中华人民共和国卫生部卫科教发〔2006〕15号）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1腹地病毒Heartlandvirus,HRTV

单股负链节段性RNA病毒，属于布尼亚病毒科的自岭病毒属，有5、M和L片段。其中，L片

段编码RNA依赖性RNA多聚酶，M片段编码糖蛋白Gn和Ge,s片段编码核衣壳蛋白和非结构蛋白。

腹地病毒主要经蝉传播，经蝉盯咬后，人可出现发热及血小板减少等症状。

3.2逆转录聚合酶链反应『＇aversetransc『iptionpolymerasechainreaction;RT-PCR

将RNA逆转录（RT）和cDNA聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。本标准采用一步法逆转

录聚合酶链式反应（RT-PCR）。在一步法RT-PCR中，首先以RNA为模板，利用下游特异性引物，

在依赖RNA的DNA聚合酶（逆转录酶）作用下转录合成互补DNA(cDNA），该步骤称作“逆转录”；

随后，再以cDNA为模板，利用上游和下游特异性引物，在DNA聚合酶的作用下进行PCR循环扩增；

最终使RNA分子的某个特定区域（目的片段）被扩增达几百万倍。

3.3实时荧光RT-PCRreal-timefluorescenceRT-PCR

是在常规RT-PCR的基础上，加入一条特异性的