盐酸吉西他滨含量测定方法验证方案.docxVIP

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验证方案 |方案#:PD |修正：000 |有效日期:

题目：ATP0603原料及产品含量测定方法验证方案

改动历史

日期 修正 改动备注

08/03/24 000 原始草稿

1目的

对ATP0603原料及产品含量测定方法的可行性进行验证。

2验证项目

验证方法的线性、范围、准确度、精密度（重现性和中间精密度）、专一性及溶液稳定性。

3含量测定方法

盐酸吉西他滨含量测定方法采用WS1—（X-448）—2003Z方法（见附件）进行检测，方法如下：

3.1试剂

下面列出的或相当的级别

盐酸吉西他滨标准品

AR级

甲醇

HPLC级

醋酸铵

AR级

冰醋酸

AR级

纯化水

HPLC级

3.2色谱条件

仪器：

HPLC系统带自动进样，柱温控制和紫外检测器

色谱柱：

AlltechC184.6X250mm,5m

流动相：

0.05mol/L醋酸铵缓冲液pH5.7：甲醇=90：10(v/v)

流速：

1.0mL/min

UV检测器

268nm

进样里：

20Ml

4验证内容

4.1线性和范围

按含量测定方法配制贮备溶液，并分别稀释成50%、75%、100%、125%、150%水平，每份样品进样3次。

举例：

精密盐酸吉西他滨标准品100.0mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀即得1.00mg/g贮备溶液。精密移取贮备液1.0ml至10ml容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀即得100%浓度水平的溶液。

在样品配制浓度±50%范围内成线性，R应不小于0.999

4.2准确度

按含量测定方法配制浓度水平为50%、75%、100%、125%、150%的溶液，100%浓度水平的配制6份，其余浓度水平的各配制三份，每份进样一次测定回收率。

举例：

精密盐酸吉西他滨标准品10.0mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀即得100%浓度水平的溶液。

计算公式：

C

回收率％= 知X100

C

real

Ccai 测得含量，mg/g

C， 实际含量，mg/g

回收率范围应在98.0%~102.0%。每个浓度水平含量测定结果的RSD应不超过2.0%。以测得含量为纵坐标，实际含量为横坐标作图（无需强制过零点），R2应不小于0.998。

4.3重现性

按含量测定方法配制浓度水平为100%的溶液6份并检测含量（可使用准确度实验所配制的溶液）。

6份样品的含量检测结果的RSD不超过2.0%。

4.4中间精密度

实验室另一化验员按含量测定方法配制浓度水平为100%的溶液测定含量。

6份样品的含量测定结果的RSD应不超过2.0%，两个化验员含量测定结果的平均值的RSD不超过2.0%。

4.5专一性

按含量测定方法分别配制空白溶液、添加剂溶液、掺杂了已知杂质的标准溶液各一份，每份进样一次。

色谱图上不应出现任何可能干扰含量测定的杂质峰。溶剂峰与标准物质峰的分离度如果小于1.5,则溶剂峰面积不得超过标准物质峰面积的0.05%。

4.6溶液稳定性

APT0603产品需在酸、碱、加热、氧化及光照条件下测试其稳定性。

参考以下表格配制溶液：

对照组

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。

酸

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加入2.5ml2M盐酸，

室温放置1小时，加入2.5ml2MNaOH，加水定容至刻度，摇匀。

碱

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加入2.5ml2MNaOH,放置24小时，加入2.5ml2M盐酸，加水定容至刻度，摇匀。

氧化

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加入2.5ml6%H2O2，室温放置1小时，加水定容至刻度，摇匀。

加热

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加入约8ml水，将容量瓶置于80C水浴锅中恒温7天。待容量瓶冷却至室温后加水定容至刻度，摇匀。

光照

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加适量水，以200W/m2的紫外光照射至少9小时，再以可见光照射22小时，加水定容至刻度，摇匀。

光照对昭组八、、-

移取1.0ml1.00mg/g的贮备溶液至10ml容量瓶中，加适量水，以铝箔包裹容量瓶，以200W/m2的紫外光照射至少9小时，再以可见光照射22小时，加水定容至刻度，摇匀。

按含量测定方法配制浓度水平为100%的标准溶液和供试品溶液，分别于室温和4°C放置，在一定时间间隔进样检测确认溶液的稳定性。

C

稳定度％=广X100

Day-0

Cdayx第X天测得含量，mg/g

Cday-0第0天测得含量，mg/g

稳定度在98