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异常色谱行为与衬

管的关系

1．拖尾峰：

n可能原因：是柱和进样衬管吸附样品组分或污染

镀金进样口密封垫；注射器针头撞击进样衬管内

填充物破碎；柱末端切口不整齐（会使样品产生

吸附）；衬管断裂。

n排除方法：换新的去活衬管；拆下色谱柱，清除

污染物，用性能可靠的毛细管熔融石英切割工具

将柱切成齐口，然后重新安装色谱柱；调节进样

口总流量在40ml/min以上。

2.前伸峰（leadingpeaks）

n可能原因：样品分解。

n排除方法：用新的去活衬管。

3.出峰后基线上升

n可能原因：样品分解。

n排除方法：用新的去活衬管。

4.大峰后基线变

n可能原因：色谱柱末端和衬管不在同一轴

线上。

n排除方法：检查末端和进样口衬管安装，

必要时调整它，使柱入口端和衬管在同轴上。

5.未分离峰

n可能原因：色谱柱或进样衬管污染或柱效

变坏。

n排除方法：用新的去活衬管。

液相色谱系统的故障有多

少与溶剂和样品的过滤有

关

1．过滤膜的类型

n聚四氟乙烯膜（一般用于有机相）几乎可以和

所以的溶剂、酸和碱相容。

n尼龙66膜（一般用于有机相）可以和大多数

溶剂、有机物和水相容，建议不要用于强酸、

二氯甲烷和DMF。

n纤维素硝酸酯(一般用于水相)主要用于过滤器,

可以和多数水性和非水性溶剂相溶,但不是所有

的水性和非水性溶剂.

n再生纤维素膜一般用于HPLC生物样品和有机

溶剂的制备和过滤,是通用型HPLC过滤器,具有

广泛的溶剂相溶性,与蛋白质键合作用低,非常

低的可萃取性.

n2、在样品溶液中有颗粒存在会造成故障时

要用膜进行过滤.

熔融硅毛细管柱组成：

n琥珀褐色（或淡黄色）聚酰亚胺（—[—CO（

CH2）34CON=CH（CH2）5NH—]n—）涂渍在

管外壁保护管防止其破裂；熔融硅空心管；均匀

涂布在管内壁的固定相（常用的有聚硅氧烷

Si(CH3)3O[Si(CH3)3O]nSi(CH3)3、聚乙二

醇、HO（CH2CH2O）nH

开管PLOT（Al2O3、分子筛、苯乙烯基苯、二乙

烯基苯-乙二醇二甲基丙烯酸酯）。

柱安装工具：

n柱切割工具如钻石、陶瓷片、宝石铅笔刀；

适当的不保留化合物；柱测试物；电子流

量计；电子检漏计（后三种为可选件）。

安装步骤1：

n检查净化管、载气、隔垫、衬管：必要时

更换净化管；在进样口换新隔垫：必要时

换衬管及镀金平板（特别是进了大量脏样

品和分析活性高化合物后）。柱的固定液

室温下容易被氧化损坏，可以使用充载气

保存延长使用寿命和减少噪音，推荐使用

带有指示色的高容量的脱氧管，带有指示

色的脱水管应安装在脱氧管前。

安装步骤2：

n套上柱螺母和密封垫、切割柱：在柱两端

安装柱螺母和密封垫，将柱固定在柱箱中，

铭牌朝外。切去柱两端约5cm，切割方法：

戴不起毛手套，手指将柱固定，用切割工

具在适当位置划一切口，不能来回切割，

也不要用切割工具完全切断。两手相向掰

去柱切割部分，用放大镜检查切口，应边

缘平整、无毛刺等。否则重新切割。

安装步骤3：

n进样口、检测器处柱的安装：柱安装在柱

箱中，边缘不要与柱箱接触；展开柱使

成圆滑的弧形，避免在紧固时使柱断裂；

依据进样口类型和检测器要求确定柱露出

长度；用手旋紧柱螺母，再用扳手旋紧，

但不要超过1/4圈；装好后不要再旋动柱；

密封垫在加热后会结合更紧密。

安装步骤4：

n开载气：调整柱头压获得合适的载气流量，下表

是推荐值，实际使用的可根据载气线速度确定。

n将柱出口端浸入正已烷，可见气泡，否则，检查

载气，流量阀，检漏，装柱前挥去残留溶剂。载

气种类选择：对毛细柱首选的载气为高纯氦和氢

气，不推荐使用氮气。对极小口径的如0.1mm内

径的毛细柱使用氢气。载气纯度至少99.995%并

且氧含量低于1ppm。但应注意氢气混合在空气中

浓度在4