课件速览-电泳法检定细胞色素C (1).pptVIP

项目二细胞色素C的生产任务九电泳法检定细胞色素C

选择适当的电泳方法，经过制胶、灌胶、加样、电泳、染色和脱色等环节检定细胞色素C原液，判定产品的质量水平任务描述电泳法检定细胞色素C2

任务支撑（一）电泳法检定的目的与作用以十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离前述工艺制得的细胞色素C原液，以主成分的相对迁移率与对照品相对迁移率是否一致鉴定主成分是否为细胞色素C。绘制分子量标准蛋白的标准曲线，并求得主成分的分子量。进一步，经凝胶成像仪扫描，按峰面积归一化法计算原液中细胞色素C的纯度。电泳法检定细胞色素C电泳法3

（二）电泳的基本原理电泳：带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。电泳技术是使用电泳仪，利用带电微粒在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象，分离物质的技术。4

（二）电泳的基本原理电场强度（E）：E=V/L电场对带电微粒的作用力（F）：F=QE?介质产生的粘滞力（F′）：F′=6πrηv电泳迁移率（U）：U=v/E=Q/6πrηV：电极电压L：电极间距离Q：带电微粒的净电荷R：球状微粒的半径η：缓冲液黏度v：电泳迁移速度带电分子由于各自的电荷和形状大小不同，在电泳过程中具有不同的迁移速度，形成依次排列的不同区带而被分开5

（三）电泳的主要类型6

（三）电泳的主要类型利用有pH梯度的介质分离等电点不同的蛋白质的电泳技术适合于分离分子量