课件速览-抗HER2单克隆抗体纯化.pptVIP

;细胞培养组将合格的丰收液送入中间库，与纯化组完成丰收液交接工作，接下来纯化组立即严格按照丰收液处理及层析等相关操作规程，对丰收液进行澄清、浓缩处理，并开展层析等纯化工作，获得符合质量标准的高纯度抗HER2单克隆抗体原液。规范填写生产记录。任务学习路径见思维导图。;;;;;;;;;;;;;;;;生产前准备;确认是否有前批清场合格证副本，确认生产环境、卫生和设备器具符合要求；填写抗HER2单克隆抗体纯化产前检查记录；领用原辅料和耗材，领用或配制生产用溶液。

;（1）离心。条件为4800rpm，大于20min，4℃。

（2）过滤。采用0.22μm除菌微孔滤芯，控制过滤压力小于滤芯最大允许压力的80%。

（3）超滤。膜包截留孔径为50kD，进口端压力小于1.3bar，出口端压力小于0.4bar，每平方英尺膜超滤体积小于50L，浓缩倍数为6倍。;1.层析介质

ProteinA。

2.上样液预处理

浓缩后上清液用2mol/LTris母液调pH为7.0～7.5。

3.层析缓冲液

（1）平衡液。40mmol/LTris-HCl，pH7.2。

（2）冲洗液。40mmol/LTris-HCl，0.8mol/LNaClpH7.2。

（3）洗脱液。60mmol/LHAc-NaAc，pH3.5。

（4）再生液。0.5mol/LNa