血凝与血凝抑制实验.pptVIP

皮下脂肪出血第31页,共41页，2024年2月25日，星期天脑膜充血出血卵黄性腹膜炎第32页,共41页，2024年2月25日，星期天有的病鸡表现眼结膜炎第33页,共41页，2024年2月25日，星期天（3）、亚急性型（非典型ND，以侵害呼吸道为主）也称肺脑炎型：其主要的特点：是症状及病变不典型。症状：多见4-35日龄鸡，25日龄前后最常发病。呼吸困难，精神沉郁，继而较早地出现神经症状，此时出现歪头，扭颈，角弓反张，倒地不能起立。第34页,共41页，2024年2月25日，星期天病变：喉头及气管粘膜水肿，出血、充血、并有大量粘液，肺呈紫黑色（肺出血性炎症）。硬脑膜下树枝状充血，并有出血点。心冠、脂肪有出血点。发病率高，死亡率较低。第35页,共41页，2024年2月25日，星期天（4）、慢性型（非典型ND）母鸡：轻者只表现产蛋率下降（约10-30%），产软壳蛋。重者出现精神沉郁，呼吸困难，黄绿色稀粪，喉头、气管粘膜充血、出血，个别病例出现消化道病变。第36页,共41页，2024年2月25日，星期天5、诊断1、血凝抑制试验（HI）：监测鸡群中的HI抗体，评价疫苗的免疫效果及鸡体内的抗体水平。2、分离病毒：鉴别弱毒及野毒。（1）分离病毒：强毒：24-72小时鸡胚死亡，弱毒一般不死。第37页,共41页，2024年2月25日，星期天6、免疫灭活疫苗（激发体液免疫）活疫苗（激发体液免疫、细胞免疫和局部粘膜免疫）I系苗、II系苗、III系苗、IV系苗和V4弱毒苗HI抗体检测：种鸡》1：64；商品鸡》1：16第38页,共41页，2024年2月25日，星期天首免时间：避开母源抗体的干扰首免日龄＝4.5(1日龄HI对数值－4）＋54.5：母源抗体的半衰期举例：HI＝1：64首免时间＝4.5(6-4)+5=14日龄第39页,共41页，2024年2月25日，星期天第40页,共41页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第41页,共41页，2024年2月25日，星期天关于血凝与血凝抑制实验一、实验目的1、掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法2、了解新城疫有关背景知识第2页,共41页，2024年2月25日，星期天二、实验内容1、血凝试验(HA)检测新城疫抗原2、血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体第3页,共41页，2024年2月25日，星期天三、实验原理1、血凝试验（HA）原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物地红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝（HA）,也称直接血凝反应。病毒颗粒红细胞第4页,共41页，2024年2月25日，星期天2、血凝抑制试验（HI）原理：当病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI）反应，也称血凝抑制反应。Iamlate！抗体抗原第5页,共41页，2024年2月25日，星期天四、实验材料1、血凝板（2人/块）2、新城疫阳性血清3、被检血清（1份）4、1％红细胞悬液5、稀释液6、移液器（50ul,2人/把）7、枪头第6页,共41页，2024年2月25日，星期天五、实验方法与结果判定血凝试验（HA)1、在血凝板上第一排的1－12孔内各加入50ul生理盐水2、在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul3、每孔加入1％鸡红细胞悬液50ul4、轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟5、结果判定第7页,共41页，2024年2月25日，星期天1234567891011122×4×8×16×32×64×128×256×512×1024×2048×红细胞对照生理盐水505050505050505050505050抗原5050505050505050505050弃50红细胞505050505050505050505050结果＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－血凝效价测定第8页,共41页，2024年2月25日，星期天结果判定标准1、＋＋＋＋：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100％凝集；2、＋＋＋