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时间考点内容平均分15年10月基因工程转基因操作16年4月基因工程植物克隆转基因和植物组培操作4.118年4月基因工程克隆技术转基因和植物组培操作、组培影响因素2.9818年11月生态工程基因工程转基因操作步骤和细节、生态工程相关内容1.9浙江省7次选考中选修3基因工程考频及得分情况材料：浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现,一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后,许多参与农药降解的基因(如P450基因和红霉素抗性基因)表达和酶活性都得到提高,在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质,有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作。质粒载体(2017·北京高考)为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1)，拟将其与质粒(图2)重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是()A．用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞C．在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞D．通过观察菊花的花色检测C基因是否在菊花染色体上表达C限制酶BamHⅠBclⅠSau3AⅠHindⅢ识别序列及切割位点农杆菌转化法生物种类植物动物微生物常用方法____________________________________受体细胞体细胞受精卵________细胞或酵母菌转化过程将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的____________上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物________处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子农杆菌转化法显微注射法Ca2＋处理法原核染色体DNACaCl2将目的基因导入受体细胞图中导入重组质粒的方法是????,在导入之前应用????处理受体细菌。Ca2＋处理法CaCl2mRNA蛋白质DNA-RNA分子杂交是否出现杂交带检验抗原-抗体杂交检验现象是否出现杂交带现象目的基因是否转入DNA分子杂交是否出现杂交带检验现象个体抗虫抗病接种实验是否抗病虫检验现象分子水平检测个体水平检测目的基因表达的检测与鉴定导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用????制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入????可将含有目的基因的细胞筛选出来。红霉素抗性基因红霉素GR66突变的“蚕宝宝”食性改变，正在吃苹果。利用转基因和CRISPR/Cas9等基因编辑手段获得了纯合突变体。******