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血栓性疾病动物模型制作具体步骤及方法

正常情况下，机体内的血液在血循环内呈液体状态，是由于体内存在

着相互拮抗的凝血和抗凝血系统。当机体受到某些物理和化学因素的

作用，或本身有创伤和感染时，可引起机体免疫和代谢功能发生改变，

造成体内凝血和抗凝血系统功能紊乱，终导致血栓形成。血栓形成主

要涉及心血管内皮、血流状态和凝血反应三方面的改变，这三种条件

通常合并存在，但常以某一条件为主。此外，当机体血液处于高凝状

态时，如DIC、手术、创伤、妊娠等引起的血液凝固性增高也是血栓

形成的原因之一。临床上血栓性疾病对患者危害，甚至可危及人的生

命，所以加强血栓形成机制、血栓临床诊断、抗血栓药物方面的研究

具有重要意义，这些研究均需要建立理想而实用的血栓动物模型。

1体外血栓模型

(1)复制方法取静脉血，注入体外旋转圆塑料环内，在体外血栓仪上

以17.5r/min转动10min，然后取下塑料环，将血栓倒在滤纸上吸干

水分，测量血栓长度、湿重及干重。

(2)模型特点模型制作方法操作简便，可直接观察血栓形成过程、测

定纤维蛋白血栓形成时间和特异血栓形成时间。本模型适用于抗栓抗

凝药物的药理研究，亦可作药物溶栓作用的研究。

(3)比较医学采用体外旋转圆环内模拟机体内的血流状态以形成血

栓。当转环在沿垂直平面上顺时针方向旋转时，可在上下弯月面形成

一个既有回流又有二次流的复杂流动区，为血小板聚集及血栓形成提

供了有利条件。本模型形成的人工血栓同机体内自然形成的血栓在组

织结构上相似。

2半体内血栓动物模型

(1)复制方法成年实验大鼠，按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊

丨巴丨比丨妥丨钠麻醉，麻醉后将大鼠仰卧固定于手术台上，颈部皮

肤常规消毒与去毛。无菌手术于颈部正中作一切口，钝性分离出左颈

动脉及右颈外静脉，再取两根聚乙烯管，分别插入左颈动脉和右颈外

静脉，然后套上另一内有丝线的聚乙烯套管，以便形成大鼠颈动静脉

回路。术毕，立即拔下套管，取出丝线用滤纸吸干残血，精密称重。

(2)模型特点制作方法简单、经济，是目前国内常用的血栓动物模型。

(3)比较医学当模型大鼠颈动静脉回路建立后，其血流中的血小板接

触旁路循环中的丝线粗糙面时，可发生黏附、聚集，血小板聚集物环

绕丝线表面形成血栓。本方法形成的血栓结构类似于动脉中的白色血

栓。用药物抑制此类血栓形成，除受血流速度和血液黏度因素影响外，

主要与药物抑制血小板黏附和聚集功能有关。

3体内血栓动物模型

1.物理刺激法

(1)机械性损伤兔血栓模型

①复制方法体重约为2.5kg的新西兰兔，按30mg/kg体重的剂量经

耳缘静脉注射戊丨巴丨比丨妥丨钠麻醉，麻醉后将兔仰卧固定于手术

台上。用无菌手术分离其一侧股深动脉，选择直径为1mm的股深动

脉血管段，用动脉夹夹住上下两端，中间留有1.5cm长的血管段为手

术部位。在体视显微镜下，用7号针头从血管段上端沿血管向下刺入

血管段内，并顺势注入生理盐水冲净血管内的血液，然后抽出针头，

再用6号微型刮匙沿刺破孔进入血管，反复搔刮血管内膜。搔刮深度

以0.5～0.7cm为宜，搔刮范围尽可能大些，以刮出少量血管内膜为

宜。稍等片刻后，松开远端动脉夹，使血液充盈血管；待刺孔不渗血

时，再取下血管两端血管夹，触摸家兔膝内侧皮下支动脉搏动示血管

通畅后，常规手术逐层缝合，关闭皮肤切口。

②模型特点术后24h模型动物即开始有血栓形成。模型制作方法简

便，容易操作，重复性好，模型成功率高，但造模过程较费时。采用

本方法也可制备静脉血栓模型。③比较医学本模型造模机制同人

类血栓形成极为相似，当刮匙搔刮损伤动物血管内膜后，可使血管内

皮下细胞外基质(ECM)裸露，促使血小板与ECM(主要是胶原纤维)接

触而被激活和黏附；同时裸露的胶原纤维激活因子及损伤的内皮细胞

可释放出组织因子，进一步启动机体内源性和外源性凝血过程，导致

血栓形成。本模型适用于动态观察血栓形成过程中血栓形态及血栓变

化规律以及评价药物溶栓作用的实验研究，也适用于与形成和溶解血

栓有关的其他实验研究。

(2)电流刺激诱导大鼠血栓模型

①复制方法成年实验大鼠，按30mg/kg体重的剂量经腹腔注射戊

丨巴丨比丨妥丨钠麻醉，麻醉后将大鼠仰卧固定于手术台上，颈部皮

肤常规消毒与去毛。用无菌手术于颈部正中作