基于微生物-脑-肠轴探讨益气解毒方抗缺血性脑卒中作用机制_NormalPdf.docxVIP

第30卷第

第30卷第6期2024年3月

Vol.30，No.6Mar.，2024

ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulae

基于微生物-脑-肠轴探讨益气解毒方抗缺血性脑卒中作用机制

杨家霖1，蔡冰洁2，戴玉豪1，李淑婷1，张可可3，高艳华1，张琪曼1，张滢4，沈建英1*，李韶菁1*

（1.中国中医科学院中药研究所，北京100700；2.安徽中医药大学，合肥230000；

3.长沙卫生职业学院，长沙410100；4.北京城市学院，北京100083）

［摘要］目的：从微生物-脑-肠轴（MGBA）角度探讨益气解毒方（YQ）治疗缺血性脑卒中（IS）的可能作用机制。方法：将大鼠随机分为5组，每组6只，分别为假手术组、模型组、YQ低、中、高剂量组（1、5、25mg˙kg-1），除假手术组外，其余各组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型。首先采用神经行为学评分判断是否建模成功并对YQ的缺血性脑卒中保护作用进行评价，再通过16SrDNA测序技术比较大鼠MCAO造模前后及YQ给药后肠道菌群的变化，并分析该方作用可能相关的生物学通路。最后通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17A（IL-17A）和白细胞介素-10（IL-10）的表达，通过蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测紧密连接蛋白ZO-1和Occludin在脑和肠组织中的表达，苏木素-伊红（HE）染色观察脑皮层区和结肠的病理变化，对可能的作用机制进行验证。结果：YQ显著提高了MCAO大鼠的神经行为学评分（P0.01），对在急性期由于富集病原体和机会致病菌引发的肠道微生物紊乱起到了较好调节作用，其中显著变化的微生物包括摩根氏菌属、埃希氏-志贺氏菌属、Adlercreutzia和安德克氏菌属等，并通过生物信息学分析发现这些菌可能与脑内炎症调节密切相关。与假手术组比较，血清中炎症因子检测发现IS模型大鼠血清中炎症因子IL-6与IL-17A显著升高（P0.01），抑炎因子IL-10的含量显著降低（P0.01）；与模型组比较，给药组血清中炎症因子IL-6与IL-17A的含量明显降低（P0.05），抑炎因子IL-10的含量显著增加（P0.01）。屏障蛋白ZO-1和Occludin的表达结果表明IS模型大鼠在脑、结肠组织中两者的表达量均明显降低（P0.05），给药组两者的表达量均明显增加（P0.05）。结论：急性脑缺血可导致肠道微生物群失调，破坏肠道屏障，增加肠道通透性。YQ可调节脑缺血引起的肠道菌群失调、抑制全身炎症反应和改善肠道-血脑屏障的破坏，阻止脑组织因炎症导致的继发性级联损伤。微生物-脑-肠轴可能是其发挥抗缺血性脑卒中作用的重要机制。

［关键词］益气解毒方；肠道菌群；微生物-脑-肠轴；缺血性脑卒中；16SrDNA

［中图分类号］R284；R285；R289；R287；R22；R2-031；R33；R24［文献标识码］A［文章编号］1005-9903（2024）06-0091-10

［doi］10.13422/ki.syfjx［增强出版附件］内容详见http：//或http：//

［网络出版地址］https:///urlid/11.3495.R1617.001

［网络出版日期］2023-12-2716:03:32

MechanismofYiqiJieduFormulaAgainstIschemicStrokeBasedonMicrobial-gut-brainAxis

YANGJialin1，CAIBingjie2，DAIYuhao1，LIShuting1，ZHANGKeke3，GAOYanhua1，ZHANGQiman1，ZHANGYing4，SHENJianying1*，LIShaojing1*

（1.InstituteofChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，