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一、引言
中草药在中国已有上千年的应用历史,天然和安全是中草药的重要特征。中草药含有的活性成分主要包括多糖、生物碱、类黄酮、挥发油、有机酸、单宁等,同时还包含多种营养素,如氨基酸、碳水化合物、矿物质和维生素等。研究表明,中草药所含的这些活性成分具有增进食欲、加快新陈代谢、促进蛋白质的合成、增加酶活性、提高机体免疫力、增强抗病性、提高肌肉品质等作用(图1)。
图1中草药对鱼类的作用和主要途径
长期以来,中草药作为诱食剂、促生长剂、抗菌剂和免疫增强剂在水产养殖领域广泛应用,被认为是抗生素、合成抗菌药、疫苗和其他化学药物的有效替代品。由于中草药的天然无害、经济易得、对养殖鱼类和环境无明显副作用等优点,近年来其在水产养殖方面的应用得到了大量的研究。中草药制剂可以是整株植物,也可以是植物的一部分(如叶、根或种子),可以在饲料中单独使用或将提纯后的制品与其他饲料添加剂组合使用,还可以将中草药直接投放到水中对鱼进行浸洗处理。然而,由于中草药的药用成分复杂,药效不够稳定,只有通过进一步的研究,深入了解中草药的化学结构和功能机制才能够实现中草药的科学高效应用。本文介绍了目前水产养殖应用中草药的功能成分及其提取和纯化技术研究进展,同时对中草药在鱼类养殖方面取得的研究成果进行了阐述。
二、传统中药材化学成分研究
中药材的化学成分结构复杂,功能物质含量细微,分析鉴定难度较大。然而,随着高分子化合物分析新技术的发展,越来越多的传统中草药经过详细研究,其关键的有效成分被确定出来(表1)。
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表1水产养殖应用(部分)中草药的主要活性成分及其化学结构式?
2001年,采用超声技术提取到中草药中的生物碱、类黄酮、蒽醌和多糖。2004年,超临界流体色谱(SFC)成为分析挥发性大分子成分如磷脂、甘油三酯和类胡萝卜素的有效方法。超临界流体技术具有选择性高的优点,可以与气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和气相色谱/质谱(GC/MS)等技术结合,精确分析中草药的活性成分。2005年,随着毛细管电泳技术的发展,结合其他化学分析技术,建立了有效的中草药痕量活性成分的分离方法。
2006年,分子蒸馏技术用于提取白术、大蒜、当归和连翘挥发油,取得了良好的效果。2008年,固定膜界面萃取技术、高速逆流色谱分离技术和分子印迹分离技术被应用于中药材化学分析。2009年,研究人员发现纤维素酶可以提高植物多糖的提取率。傅里叶变换离子回旋共振质谱/多级质谱(FTICRMS/MSn)技术结合高效液相色谱(HPLC)可分析获得精确的成分质量数据。研究人员首先通过高分辨质谱法获得中草药中各种化学成分的准确质量,然后结合多级质谱碎片信息分析,高效地鉴定出淫羊藿的功能成分。2012年,吕惠敏采用紫外(UV)分光光度法鉴定和定量中草药的活性成分,测定了各种多糖、生物碱、类黄酮和挥发油的浓度。2013年,刘晓洁利用咪唑类离子液体作为萃取剂,采用微波提取法从香椿和月季中获得槲皮素和山奈酚。
2014年,濮玲等通过12种中药材的主成分分析得到了三个主成分和相应的主成分方程,将主成分分析用于综合评价中草药质量。2015年,黎人恺将磁铁矿(Fe3O4?)磁性纳米粒子用作中药载体,用于分离从黄芩和甘草中提取的活性成分,从而建立了一种中药分离纯化的新方法。
三、中草药对鱼类生长和饲料利用的影响
一些中草药可以通过刺激养殖鱼的味蕾来提高饲料的适口性,从而增加饲料摄入量。例如,将丁香和陈皮等以0.2%的比例添加到基础饲料中可以显著提高鲤鱼(Cyprinuscarpio)的摄食量。黄芪、淮山药、山楂、枸杞、陈皮和黄柏对金鱼(Carassiusauratus)具有显著的诱食作用。报道显示,含有小檗碱和山奈酚的中药饲料添加剂对促进施氏鲟(Acurenserschrenckii)摄食产生一定的作用。此外,陈皮、山楂、丁香、杜仲和五味子的0.4%(w/w)水提取物在增进锦鲤(Cyprinuscarpio)摄食量中起到明显作用。
王裕玉研究认为,陈皮中的游离氨基酸、核苷酸和生物碱可能是对养殖鱼类产生诱食效果的原因。大多数学者认为,正是中草药独特的气味和味道(如肉桂、当归、山楂、八角、茴香等)导致其在促进鱼类摄食过程中起重要作用。此外,中草药可以刺激消化液的分泌并加快肠蠕动,这也可以解释为摄食量增加的原因。
研究表明,中草药所含生物活性物质可以通过增强新陈代谢、促进蛋白质的合成、激活消化酶从而改善鱼的生长表现。
在人工饲料中添加2.0%的黄芩和茯苓等组成的添加剂养殖眼斑拟石首鱼(Sciaenopsocellatus),实验组增长率比对照组增加10.4%~32.3%。另有研究表明,一些中草药(如连翘、黄连和茯苓)中的木质素、黄芩苷、多糖和小檗碱可以作为生长促进剂应用于凡纳滨对虾(Litopenaeusvann
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