- 1、本文档共3页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
长春花MT基因克隆、原核表达及其功能分析的开题报告
开题报告
论文题目:长春花MT基因克隆、原核表达及其功能分析
撰写人:XXX
学号:XXX
指导教师:XXX
一、研究背景
长春花(LonicerajaponicaThunb.)是一种常见的中草药和食用植物,具有广泛的药用和保健价值。MT(Metallothionein)是一种低分子量的蛋白质,含有大量半胱氨酸和组氨酸,具有很好的金属离子结合能力。MT在植物生长和发育、生理应激、重金属胁迫等方面发挥着重要作用。因此,克隆和研究长春花MT基因及其功能具有重要的理论和实际意义。
二、研究目的
本研究的主要目的是克隆长春花MT基因,构建原核表达载体,表达获得重组MT蛋白,并进一步探讨其在植物生长和发育、生理应激、重金属胁迫等方面的功能。
三、研究内容和方法
1.克隆长春花MT基因
从长春花中提取总RNA,通过RT-PCR方法进行MT基因的扩增。将扩增产物克隆至pMD19-T载体中,测序验证序列正确性。利用软件分析序列长度、氨基酸序列、亚细胞定位等注释信息。
2.构建原核表达载体
根据MT基因序列设计引物扩增MT基因,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,得到重组质粒pET-28a(+)-MT。
3.原核表达与纯化MT蛋白
将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达目的蛋白。通过SDS检测表达情况,利用柱层析技术纯化目的蛋白并进行Westernblot验证。
4.重金属离子抗性实验
将得到的MT蛋白和对照组的BSA蛋白分别与不同浓度的Cu2?、Zn2?、Cd2?等金属离子处理,观察MT蛋白在重金属离子作用下的稳定性变化。
五、研究意义
本研究将能够克隆得到长春花MT基因,并构建原核表达载体,表达重组MT蛋白,为深入研究长春花MT蛋白在植物生长和发育、生理应激、重金属胁迫等方面的作用机制提供了实验途径。同时,本研究将为开发植物抗重金属胁迫材料提供理论基础。
六、进度安排
本研究预计在6个月内完成,具体进度安排如下:
第1-2个月:提取长春花总RNA,克隆MT基因,并构建原核表达载体。
第3个月:表达并纯化重组MT蛋白,进行Westernblot验证。
第4-6个月:进行重金属离子抗性实验,分析MT蛋白在重金属离子作用下的稳定性变化。
七、参考文献
1.张莉.金属硫蛋白家族蛋白发育生物学功能研究进展[J].生命科学仪器,2017(01):20-23.
2.刘宁,李顺宝,邹驹,等.重金属污染对植物生理生态效应的研究[J].生物技术通报,2018,34(03):207-210.
3.Deng,W.,Ma,J.,Chen,S.,etal.Genome-wideidentificationandanalysisofthestress-resistancefunctionoftheTPS(trehalose-6-phosphatesynthase)genefamilyincotton[J].BMCGenomics,2019,20(1):811.
4.SunY,LinL,JinP,etal.Transcriptome-wideidentificationandfunctionalanalysisofmetallothioneinandphytochelatinsynthasegenesinmaize(ZeamaysL.)inresponsetocadmiumstress[J].EcotoxicolEnvironSaf,2020,189:110018.
您可能关注的文档
- 马氏珠母贝肉醒酒作用及其醒酒机理的研究的开题报告.docx
- 面向移动终端的三维几何简化与传输方法的研究的开题报告.docx
- 面向对象的高分辨率遥感图像变化检测方法研究的开题报告.docx
- 高中物理课堂中渗透科学方法教学的研究与实践的开题报告.docx
- 高精度近地表模型软件研发与应用的开题报告.docx
- 降黄合剂Ⅰ号治疗慢性重型肝炎及其内毒素血症的临床研究的开题报告.docx
- 高等教育选择问题探究的开题报告.docx
- 铜掺杂近化学计量比铌酸锂晶体的生长及其性能的研究的开题报告.docx
- 青岛卷烟厂原料配方自动化立体仓库项目的设计及实施的开题报告.docx
- 高校负债经营与风险管理的开题报告.docx
最近下载
- 2019新外研社版一起点小学英语四年级上册单词听写及句子默写整理好直接打印版.pdf VIP
- 西软宽带安全审计管理软件说明书.doc
- 监理公司各部门职责.doc
- 国家电网公司配电网工程防触电、防高坠、防倒杆“三十条”工作措施.doc VIP
- 会阴擦洗的护理流程课件.ppt
- 《江苏省水利工程施工质量检验与评定规范》:建筑工程(附录).doc
- 2021年人教版五年级语文下册期末检测5套.pdf VIP
- 24186企业法务[纸考]2023.12.docx
- 初中物理大气压强习题(附有答案).doc VIP
- 2024年03月四川省南充市财政局及局属参公事业单位2024年公开遴选(考调)工作人员笔试参考题库附带答案详解.docx VIP
文档评论(0)