《生物技术大实验》教学大纲.docx

生物技术大实验－细胞工程

课程编号：

适用专业：生物技术

学时数：48

学分数：1

一、实验目的与要求：

本课程是生物技术专业的专业课程的综合性大实验，是结合基因工程、细胞工程、微生物工程、蛋白质工程、酶工程、生物工程下游技术的相关技术而开设的综合性、设计性实验，由细胞工程实验、生物大分子分离与分析技术实验、微生物工程实验三部分组成。细胞工程技术是一般包括细胞培养技术、细胞融合技术、单克隆抗体技术、细胞折合技术、染色体工程技术、繁殖生物学技术等一系列重要基础技术。

实验目的：通过本课程的学习使学生初步掌握植物、动物细胞的培养、融合和核移植等细胞水平上的基本操作技术和实验设计方法。使学生系统地掌握生物工程领域内的基本技术和基本技能，为更好地将生物技术应用于人类的生产和生活实践打下坚实的基础。同时，通过实验，培养学生观察、思考、探究、分析和解决问题的能力；养成实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。

实验要求：

1．掌握基本细胞工程技术的操作技能。2．了解细胞工程的各种技术的基本原理，技术路线和方法。3.?在掌握基本知识的前提下，能针对具体课题对重要研究的技术路线进行初步设计。

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二、实验项目与提要：

序号

实验项目

必做

选做

时数

内容提要

实验

类型

每套仪

器人数

1

动物细胞工程常用培养液配制与检测

必做

4

1．细胞工程实验室基本操作技术

2.?液体配制的准备

3.?常用操作液及培养液的配制

综合性实验

4-5

2

CO2培养箱等培养设备使用

必做

3

1．CO2培养箱使用方法

2.?倒置显微镜使用方法

基础性实验

15-20

3

小鼠组织细胞原代培养

必做

4

1．组织块法原代细胞培养

2．酶消化法原代细胞培养

综合性实验

4-5

4

小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集、运动能力检测与结构观察

必做

4

1．精子采集

2．精子运动能力检查

3．精子整体结构观察

4．精子顶体结构观察

综合性实验

4-5

5

小鼠输卵管卵母细胞采集与结构观察

必做

4

1．激素的分装、配制

2．小鼠超排处理日程安排与超排处理

3．小鼠卵母细胞采集及结构观察

综合性实验

4-5

6

小鼠超数排卵及附植前不同发育阶段胚胎采集与结构观察

必做

12

1．小鼠超排处理日程安排与超排处理

2．胚胎采集

2.1输卵管胚胎采集

2.2子宫角胚胎回收

3．检胚及胚胎的形态学观察与鉴定

设计性实验

4-5

7

小鼠组织细胞传代培养

必做

4

1．原代培养的首次传代

2．细胞传代方法（酶消化法）

3．细胞冻存保存

综合性实验

4-5

8

小鼠胎儿成纤维细胞活性检测及细胞计数

必做

4

1．台盼蓝排除检测法检测小鼠胎儿成纤维细胞活性

2．溴化乙锭和碘化丙锭排除检测法检测小鼠胎儿成纤维细胞活性

3.?细胞计数

综合性实验

4-5

9

细胞的冻存和复苏

选做

3

1．动物细胞的冷冻

2．动物细胞的复苏

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综合性实验

4-5

10

生产转基因动物综合技术体系的方案设计

必做

6

1.了解动物克隆技术的综合过程

2.?掌握利用体细胞克隆技术生产转基因动物的原理和技术流程

3.设计一套生产转基因动物综合技术体系的方案

综合性实验

4-5

三、成绩考核方法：

1．平时成绩：包括出勤、课堂提问、讨论情况等，占20％

2．操作成绩：实验的操作，及实验的效果等，占20％

3．报告成绩：实验报告等，占20％

4．考试成绩：占40％

5．综合考核成绩占100％

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四、教材及主要参考书：

教材：

1.《细胞工程实验指导》自编教材?2005.9

2.《细胞工程》李志勇编著科学出版社?2003.8

参考书：

1.《植物细胞工程原理与技术》周维燕主编中国农业大学出版?2001.10

2.《动物细胞工程原理与实践》冯伯森主编科学出版社?2000.5

3.《细胞工程学》王蒂主编国农业出版社2003.7.

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