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PNPLA3基因I148M过表达Huh7细胞中SREBP-1c与甘油三酯的关系中期报告
研究背景:
甘油三酯是人体内重要的能量来源,但当油脂积累过多时会导致脂肪肝等各种疾病,因此研究甘油三酯的代谢调控机制对于疾病的治疗和预防具有重要意义。
PNPLA3基因I148M多态性与甘油三酯代谢异常的关联性已被广泛研究,但其具体作用机制仍不清楚。此前的一些研究表明,PNPLA3基因I148M多态性可能通过影响SREBP-1c的调节而影响甘油三酯代谢。
本研究旨在探究PNPLA3基因I148M过表达是否能够影响Huh7细胞中SREBP-1c与甘油三酯的关系。
实验方法:
1.构建PNPLA3基因I148M过表达模型
使用Huh7细胞株,利用PCR方法克隆PNPLA3基因,构建PNPLA3基因I148M过表达模型。
2.测定细胞内甘油三酯含量
使用化学法测定PNPLA3基因I148M过表达Huh7细胞和控制组细胞的甘油三酯含量。
3.检测SREBP-1cmRNA和蛋白的表达量
使用qRT-PCR和Westernblot分别检测PNPLA3基因I148M过表达Huh7细胞和控制组细胞中SREBP-1cmRNA和蛋白的表达量。
预期结果:
本研究预期发现PNPLA3基因I148M过表达会导致Huh7细胞内甘油三酯含量的增加,并且会影响SREBP-1c的调节,从而影响甘油三酯的代谢。具体机制需要进一步研究探究。
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