第六章-核移植技术与动物克隆.ppt

第六章

核移植技术与动物克隆一什么是克隆技术？克隆技术：为无性生殖或无性繁殖，即由同一个祖先细胞分裂而形成的纯细胞系，这个细胞系每个细胞的基因彼此是相同的。克隆技术在现代生物学中被称为“生物放大技术”，它已经历了三个发展时期：1938年德国胚胎学家Spemann最先提出将多细胞胚胎的每一个细胞核移植到去掉核的卵母细胞中，使它们重新发育成胚胎的设想。

2.鱼类的核移植技术从1961年开始，童第周等以金鱼和鳑鮍鱼为材料，进行鱼类不同亚科间的细胞核移植获得成功，用以研究杂交细胞核与纯种细胞核在发育功能上的差异，以及细胞质对细胞核的影响．1989年，童第周、牛满江又将鲫鱼胚胎细胞核移入鲤鱼去核的未受精卵中，实现了不同种间的核质杂交，成功地无性繁殖了“鲤鲫核鱼”新品种。1979年，中国科学院武汉水生物研究所利用鲫鱼做移核试验。他们把鲫鱼囊胚期细胞经过385天59代连续传代培养后，再将此种培养细胞的细胞核移植到同种鲫鱼的未受精卵中。到1980年4月，他们成功地培育了两尾无性繁殖的幼鱼，其中一条发育正常。3、哺乳动物细胞核移植技术1977年，美国缅因州巴尔港的杰克逊实验室用“亚无性繁殖”的方式，培育出7只单亲小鼠。步骤：（1）将卵细胞受精，在精、卵核融合之前，把精核去掉，然后放入加有适量细胞松驰B的溶液中。（2）经此番处理的卵细胞的染色体复制后出现了两个核，将此双核细胞放入正常培养液中培养。（3）卵中的双核细胞自动融合，并且细胞开始分裂。（4）将此种胚胎移入母鼠子宫培育。（5）生产出7只单亲小鼠。1981年，瑞士日内瓦大学和美国杰克逊实验室合作，首次对小鼠卵进行移核试验获得成功。第二节克隆羊与体细胞核移植一克隆羊多利（Dolly）1997年12月，英国Roslin研究所利用核移植技术克隆了多利羊（Dolly）。它是世界上首例利用成年哺乳动物体细胞作为供体细胞繁殖的克隆羊，即成体母羊的复制品。此后，利用体细胞核移植去核卵细胞技术得到了克隆鼠、克隆牛等克隆动物。实验的成功揭示并进一步验证一个全新概念：由成年机体的一个体细胞核，可以复制一个基因完全相同的新生命个体。是21世纪生命科学的一个新里程碑二、克隆技术存在的问题理论问题分化的体细胞克隆对遗传物质重编（细胞核内所有或大部分基因关闭，细胞重新恢复全能性的过程）的机理还不清楚；克隆动物是否会记住供体细胞的年龄。克隆动物的连续后代是否会累积突变基因。在克隆过程中胞质线粒体所起的遗传作用等问题还没有解决。实践问题克隆动物的成功率还很低生出的部分个体表现出生理或免疫缺限。即使是正常发育的“多莉”，也被发现有早衰迹象第一步取妊娠期的6岁母绵羊（FinnDorset白品种母羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用饥饿法使其进入休眠状态而使全部基因具有活性。克隆羊的技术一般步骤第二步注射促性腺激素，促使母羊（SottishBlackface黑面母绵羊）排卵，28~33小时取其未受精卵，快速去核，放入10%FCS、1%FCS和0.5%FCS连续5天，使其进入G0期做受体细胞。第三步乳腺细胞与无核卵放入同一培养皿中，在微电流的作用下，将乳腺细胞融入卵中，形成一个含有新的遗传物质的卵细胞。第四步新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6天后发育为桑椹胚或囊胚（8~16个细胞）。第五步将此早期胚胎移入假孕母羊子宫中，产下多利即为6岁母羊的复制品，也为白色。伦理道德克隆技术（尤其是在人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击使公众对此有强烈的反应，也限制了克隆技术的应用。**第一节动物克隆技术克隆技术第一个发展时期—微生物克隆。即用一个细菌很快复制出成千上万个和它一模一样的细菌，而变成一个细菌群；克隆技术第二个发展时期—生物技术克隆。比如用遗传基因―DNA克隆；克隆技术第三个发展时期—动物克隆。即由一个细胞克隆成一个动物。克隆绵羊“多利”由一头母羊的体细胞克隆而来，使用的便是动物克隆技术分子水平上的克隆----基因克隆细胞水平上的克隆----细胞克隆个体水平上的分子克隆----动物克隆/植物克隆克隆技术分类什么是动物克隆？动物克隆：不经过有性生殖过程，而是通过核移植生产遗传结构与细胞核供体相同动物个体的技术叫动物克隆。发育早期的动物胚胎细胞，或成年动物的体细胞，经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中，在适当的条件下，可以重新发育成正常胚胎；将这种正常发育的胚胎移植到生殖周期相近的母体之中，可以发育成为正常动物个体。这种经过核移植而产生的动物，其