项目6 人工授精技术.ppt

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项目六人工授精技术种公猪在后裔遗传中占有50%的影响力,优良公猪的充分利用,将带来可观的经济效益,人工授精可大大提高公猪的利用率,减少公猪饲养量。此外,人工授精技术还在于减少疾病传播、优良基因的迅速扩散、提高母猪受胎率等方面存在积极意义。猪人工授精即利用人工方法采集公猪的精液,对其进行品质检查、稀释保存等处理,再用器械将精液输送到发情母猪生殖器官内,使其受孕。目前,世界上每年大约有2500万头次猪进行人工授精。其中,超过99%的人工授精使用的是储存在15℃~20℃下,最多保存3天的液态冷藏精液。日常工作计划08:00-08:30记录保温箱温度,对前天保存精液进行检查;08:30-09:30准备上午用精液及授精器材;09:30-10:30准备好采精器材,配合采精员采精后做好精液的检查、稀释、分装、保存及报表记录;10:30-11:30人工授精器具的清洗、消毒、保存备用;11:30-12:00清洁卫生、各种设备的检查;12:00-13:30午餐、午休;13:30-14:00记录保温箱温度,准备好采精器材;14:00-15:00配合采精员采精后做好精液的检查、稀释、分装、保存及报表记录;15:00-16:00准备下午用器具的清洗、消毒、保存备用;17:00-17:30清洁卫生、各种设备的检查。技术要求一、人工授精所需器具1、人工授精的用具和物品仿真物;显微镜;酒精灯;镜片保温器;恒温水浴箱;分光仪;恒温箱;接种环;温度计;计时器:精密电子天平;化学试剂称量纸;化验用封胶;铝箔;500mL塑料瓶(装盐水);输精管;棉纱、棉球;试管架;计数器;镜头擦纸;熟料瓶;;放精液保温箱;煤气炉和消毒蒸锅。2、必备的玻璃制品500mL、800mL烧杯;500mL、1000mL、2000mL精液储瓶;容量瓶;凹玻片;载玻片;口径1.5cm长5cm的试管;盖玻片;玻璃棒;染色杯;玻璃吸管;玻璃漏斗。恒温水浴锅精液储瓶及精液3、用于稀释的化学试剂及稀释剂葡萄糖;碳酸氢钠;乙二氨四乙酸二钠盐;柠檬酸三钠;三羟基甲基氨基甲烷二、精液的生产1、配制0.9%盐水称9克氯化钠放入盐水瓶,加蒸馏水达1000mL,紧塞瓶口后,放进蒸锅消毒,开水蒸煮30分钟,冷却后即可使用。0.9%等渗生理盐水是用来清洗各类与精液直接接触的器皿。此盐水的浓度与精液渗透压相近,不会引起精虫的死亡,如用蒸馏水,将使精虫致死。2、玫瑰红染色液配制称3克玫瑰红,加入99mL蒸馏水,用玻璃棒搅匀后,再加1mI40%福尔马林。此稀释剂用于对精虫进行染色,以便于检查异常的精子。3、稀释液配制精液稀释液是与新鲜精液渗透压接近,用于扩大精液容量,给精子提供营养、中和精子代谢产物、保持精液PH值的生理溶液。稀释液配制的要求是:1、严格按照配方进行配制,并保证与蒸馏水混合彻底溶解;2、稀释前稀释液温度应与新鲜精液尽可能一致;3、稀释液一旦配制,必须在24小时内用完。稀释液温度设定的原则是尽可能与采集到的精液温度一致,误差不超过2℃。稀释液温度的控制,通常采用的方法是将水浴锅温度设定为与精液一致的温度上,然后将配制的稀释液放入水浴锅中维持一段时间,夏季为37~38℃,冬季为35~36℃,春秋季节为37℃。4、恒温加热板的预温

活力是精子的一个重要质量指标。精液在接近动物体温的情况下,在显微镜下能准确观察到精子的活力。因此采精前应先对加热板和载玻片预温,调定到显示37℃或38℃。5、精液品质检查

(1)精液直观项目检查色泽:正常的猪精液从浅灰白色到乳白色。气味:正常猪精液只有很淡的腥味。凝集度:质地均匀。射精量:是与收集精液的总精予数有关的重要指标。原精液涂片镜检图像A、制作活力检查的精液压片B、精子活力评分①精子活力应在37-39℃的温度下检查,先用100倍检查,即用10倍的目镜和10倍的物镜进行整体观察,然后再把物镜调成40倍(即放大倍数为400倍)进行观察。按十级评分制:90%的精子呈前进运动的精液活力为0.9,80%的精子呈前进运动则为0.8,依此类推。按1级制评分,合格精液精子活力应不低于0.7。②新鲜精液在100倍下观察,并不容易看到单个的精子活动,因此要进行整体观察。按照五级评分制评分:合格精液的精子活力应不低于3分。在400倍下观察,应进行分区判断,以便确定呈前进运动的精子占总精子数的百分比。(3)精子密度测定

指每毫升精液中所含的精子数,是确定稀释倍数的重要指标,要求用精液密度仪测定。(4)精子畸形率测定

精子畸形率是指精液中畸形(形态异常)的精子占总精子数的百分率,

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