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岛津液相色谱仪操作规程汇报人:2024-01-23
CONTENTS液相色谱仪基本原理与结构仪器准备与启动样品处理与进样方法色谱柱选择与安装流动相配制与使用方法数据采集、处理与报告生成仪器维护与故障排除
液相色谱仪基本原理与结构01
液相色谱法概述液相色谱法是一种基于物质在固定相和流动相之间分配平衡原理的分离技术。适用于分离极性、非极性、离子型和非离子型化合物,具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点。
包括输液泵、流动相贮存器和梯度洗脱装置等,用于提供稳定、连续的流动相。高压输液系统包括进样器、进样针和进样阀等,用于将样品注入色谱柱。进样系统色谱柱是液相色谱仪的核心部件,由柱管、固定相和接头等部分组成,用于实现样品的分离。分离系统包括检测器、数据处理装置和记录器等,用于检测色谱柱流出物中各组分的浓度或质量,并将结果记录下来。检测系统岛津液相色谱仪组成
工作原理及流程基于物质在固定相和流动相之间的分配平衡原理,利用色谱柱对样品进行分离。当流动相携带样品通过色谱柱时,样品中的各组分在固定相和流动相之间进行多次分配,由于各组分的分配系数不同,因此它们在色谱柱中的保留时间也不同,从而实现分离。工作原理开机预热→设置参数→配制流动相→平衡色谱柱→进样→采集数据→数据处理→结果分析。工作流程
仪器准备与启动02
确保操作环境温度稳定在20-25°C,相对湿度保持在45%-65%之间,以提供稳定的仪器性能和色谱分离效果。温度与湿度仪器应放置在通风良好的地方,避免灰尘和腐蚀性气体的侵害。通风与防尘环境条件设置
将仪器电源线插入符合规格的电源插座,并确保接地良好。打开仪器电源开关,检查仪器面板上的电源指示灯是否亮起,确认仪器已正常供电。电源接通与检查电源检查电源连接
按照仪器操作面板或软件界面的提示,启动液相色谱仪及相关软件。等待仪器完成系统自检,确保各部件和模块工作正常。如有异常提示,请及时联系维修人员。根据实验需求,设置合适的流动相、流速、柱温等参数。确保参数设置正确无误,以免影响分析结果。启动仪器系统自检设置参数仪器初始化操作
样品处理与进样方法03
确保样品中无颗粒物或杂质,以避免对色谱柱和仪器的损害。使用适当的溶剂将样品完全溶解,确保进样时样品的均匀性。根据实验需求调整样品浓度,避免过高或过低的浓度影响分析结果。样品纯度样品溶解样品浓度样品前处理要求
选择合适的进样针根据进样体积和样品性质选择合适的进样针,确保进样的准确性和重复性。清洗进样针每次使用前和使用后,用适当的溶剂清洗进样针,避免残留物对后续分析的影响。正确使用进样针掌握正确的进样针操作方法,如抽取、排出样品等,确保进样的准确性和稳定性。进样针使用技巧
01021.准备工作打开液相色谱仪电源,启动工作站软件,设置实验参数(如流动相比例、流速、柱温等)。2.平衡色谱柱在进样前,让流动相在色谱柱中流动一段时间,使色谱柱达到平衡状态。3.进样用进样针抽取适量样品,通过进样口将样品注入色谱柱中。注意进样时要避免产生气泡和漏液现象。4.记录色谱图启动数据采集系统,记录色谱图并保存数据。观察色谱峰的分离效果和峰形,判断实验结果的准确性。5.清洗进样口和色谱柱实验结束后,用适当的溶剂清洗进样口和色谱柱,避免残留物对仪器和后续实验的影响。030405样品进样操作步骤
色谱柱选择与安装04
适用于极性化合物的分离,常用硅胶、氨基等填料。适用于离子型化合物的分离,常用强阴离子、强阳离子等交换树脂。适用于非极性至中等极性的大多数化合物,常用C18、C8等填料。适用于大分子物质的分离,如蛋白质、多糖等。反相色谱柱正相色谱柱离子交换色谱柱凝胶色谱柱色谱柱类型及特点
确保色谱柱与仪器接口匹配,避免漏液。安装前检查色谱柱是否完好,无破损或堵塞。按照仪器说明书正确安装色谱柱,注意方向和紧固力度。安装完成后进行系统检漏,确保无泄漏现象。色谱柱安装注意事项
更换色谱柱前,先关闭仪器电源,卸下旧色谱柱。安装新色谱柱时,注意与仪器接口对齐,轻轻旋紧固定螺丝。更换完成后进行系统冲洗和平衡,确保新色谱柱性能稳定。定期对色谱柱进行清洗和维护,以延长使用寿命和提高分离效果。色谱柱更换和维护方法
流动相配制与使用方法05
流动相通常由有机溶剂、水和添加剂等组成,其选择应根据样品的性质和分析要求进行。组成流动相在液相色谱分析中起到溶解样品、携带样品通过色谱柱、与固定相相互作用以实现分离等重要作用。作用流动相组成及作用
配制步骤根据分析要求选择合适的有机溶剂和水。按照一定比例将有机溶剂和水混合,并加入适量的添加剂。流动相配制步骤和注意事项
充分搅拌混合均匀后,进行过滤和脱气处理。流动相配制步骤和注意事项
010302配制过程中应使用优质纯净的试剂和溶剂。注意事项04过滤和脱气处理是为了去
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