7-1第七章-食品微生物检验-菌落总数测定.ppt

对照空白对照：不加样品，只在平皿注入平板计数琼脂培养基，反应培养基中的杂质及污染情况稀释液对照：加1mL无菌稀释液，平皿注入平板计数琼脂培养基，反映稀释液是否受到污染样品对照：加1mL样品稀释液，平皿注入平板计数琼脂培养基，凝固后放冰箱，以区别样品中的杂质无菌操作对照：打开平板计数琼脂培养基平皿，并在空气中暴露30min，反应空气质量和操作技术。洁净级别标准超净工作台，要求100级；无菌室空间，要求1万级。*2.培养2.1琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃培养箱内培养48h±2h。水产品采用30℃±1℃培养72h±3h(08，10,16新增)。2.2琼脂凝固后，如果怀疑样品中含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在表面覆盖一薄层琼脂培养基（约4mL），并在报告上记录该操作，待覆盖层凝固，翻转平板，按2.1条件进行操作。3菌落计数3.1可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录相应的菌落数量和稀释倍数。菌落计数以菌落形成单位（colonyformingunits,CFU）表示。

3.2平板菌落数的选择

选取菌落数在30CFU～300CFU个之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU个菌落的平板记录具体菌落数，大于300的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板平均数。3.3其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘2，代表全平板菌落数。3.4当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，即将每条链作为一个菌落计数。如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落；如果有不同来源的几条链，则应将每条链作为一个菌落计。平皿分4部分点数：求同一稀释度的平均菌落数：A1数+A2数2（1）若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每克（毫升）中菌落总数结果。（见表例1）。（2）若有两个连续稀释度在适宜计数范围内（30～300个菌落）时，按如下公式计算：N=∑C/(n1+0.1n2)d式中：N—样品中菌落数；∑C—平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和；n1—?第一稀释度（低稀释倍数）平板个数；n2—?适宜范围菌落数的第二稀释度（高稀释倍数）平板个数；d—?稀释因子（第一稀释度）；4.结果与报告4.1菌落总数的计算方法：菌落计算公式有两个稀释度的菌落数在合适范围的情况下，使用菌落计算公式。*例一*例二*（3）若所有平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表例4）。（4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表例5）若所有稀释度均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。（5）若所有稀释度的平均菌落数均不在30-300之间，其中一部分大于300或小于30时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表例6）。（6）若所有稀释度的菌落数均不可计数，则以最高稀释倍数无法计数报告之（见表例7）。菌落总数测定实验结果图片展示

10-310-210-1稀释度选择及细菌总数报告方法（表7）稀释液及菌落数10-110-210-311,3651642016，40016，000或1.6×10422,7602954637，7503.1000或3.1×1032,8902716027，1003不可计4，6505