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血液采集与血清的提取1.血液的采集免疫动物经效价检测合格后即可采血。不合格者,再度免疫,多次免疫仍不合格者淘汰。高度免疫最后一次大剂量注射抗原后7~10天进行第一次采血。采血可以全放血(一次采集)或部分采血(多次采集)。血液采集与血清的提取多次采血者,第一次采血时采血量按每千克体重采血约10ml,经3-5天第二次采血,按每千克体重采8-10ml。第二次采血后经2-3d,注射足量免疫原。如此循环注射免疫原和采血。全放血在最后一次高免之后8-11d进行。采血前,动物禁食24h,但需饮水以防止血脂过高。血液采集与血清的提取一次放血方法?绵羊或其他大动物可用颈动脉放血,家兔、豚鼠和鸡则可通过心脏直接采血。多次采血方法?大动物可通过静脉采血,家兔、豚鼠和鸡等小动物可通过心脏采血。注意事项①实施无菌操作②采血时不加抗凝剂血液采集与血清的提取2.血清的提取(1)自然凝结加压法将血液采入玻璃容器内,于室温下自然凝固,待血清自然析出。为了有助于血清析出,在凝血块上可加以灭菌的不锈钢压砣。用无菌滴管吸取自然析出血清,于3000r/min离心15min,取上清液,放入灭菌瓶中。血液采集与血清的提取(2)枸橼酸盐血浆分离血清法按每1000ml血液加入10%的枸橼酸钠35ml,待红细胞沉集后提取血浆,按每1000ml血浆加入30%氯化钙溶液1.3ml,室温下静置澄清两昼夜后,经振荡脱去纤维获得血清。血液采集与血清的提取3.血清的处理检验合格的抗病血清加入终浓度为0.5%石炭酸或0.01%硫柳汞防腐。放置数日作无菌检验。无菌的血清,组批分装,保存于-20℃以下半成品库,待抽检合格后交成品库保存出厂。
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