原创力文档- 1、本文档共2页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
miRNA-1在离体大鼠心脏缺血后处理中对缝隙连接蛋白43的作用的开题报告
研究背景与意义
心肌梗死是心血管疾病的主要死因之一，其最大危害在于产生了严重的心肌损伤和细胞死亡。缺血引起的细胞死亡与缝隙连接蛋白43(connexin43，Cx43)的表达异常有关。Cx43是心肌细胞之间的关键连接蛋白，能够增强色素扩散和细胞间通讯，从而促进心肌细胞之间的相互作用。因此，维持Cx43稳定的表达是维持心肌细胞健康的关键。过去的研究表明，在心外科手术或缺血/再灌注，及多种遗传性和获得性心血管疾病等情况下，Cx43表达水平明显受到影响。
miRNA是一种微小的RNA分子，大小在18至25个核苷酸之间，能经由RNA干扰调节(Cx43)的表达来调节细胞功能，在心肌损伤和心血管疾病中发挥重要作用。然而，miRNA在缺血心肌中对Cx43的生物学和分子机制仍然不清楚。
在此背景下，该研究旨在探讨miRNA-1在离体大鼠心脏缺血后处理中对Cx43的作用及其分子机制，为研究心肌缺血损伤的发病机制提供理论依据。
研究内容和方法
1.建立离体大鼠心脏缺血处理模型
选用50只大鼠，剖开胸腔，挤压心脏使其停跳；将心脏摆在显微镜下，通过左前降支冠脉诱导缺血处理。
2.提取组织中的miRNA和蛋白质
分别用Trizol试剂和CHO提取试剂提取标本中的miRNA和蛋白质，并进行质量和纯度检测。
3.制备miRNA-1和Cx43基因的表达载体
将miRNA-1和Cx43基因克隆到表达载体中，通过邻近电磁转化装置转化至大肠杆菌中，筛选正义菌并进行大量培养，采用断裂法制备大量表达载体。
4.细胞实验
用miRNA-1和CX43表达载体分别转染HCaF心肌细胞系，利用RT-qPCR和Westernblot分别检测细胞中miRNA-1和Cx43表达水平，以研究miRNA-1和Cx43的相互作用和影响机制。
预期结果
本研究旨在探讨miRNA-1在离体大鼠心脏缺血后对Cx43的作用及其分子机制。预期结果包括：
1.离体大鼠心脏缺血处理后，Cx43基因的表达水平会明显下降，同时miRNA-1的表达水平会上升。
2.在HCaF心肌细胞系中，miRNA-1通过抑制Cx43基因的表达来影响心肌细胞间通讯，从而导致心肌细胞死亡和心肌损伤。
结论
本研究将通过深入研究miRNA-1和Cx43相互作用原理，并通过建立相应的研究模型，明确miRNA-1在心肌损伤中调节Cx43表达的分子机制和生物学功能，为心肌缺血损伤的发病机制提供理论依据。
文档评论（0）