【生物】目的基因的检测与鉴定课件-2023-2024学年高二下学期生物人教版(2019)选择性必修3.pptxVIP

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检查目的基因进入受体细胞后,是否稳定维持和表达其遗传特性;;;(1)首先取出转基因生物的基因组DNA;;;;;从转基因棉花中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交,若出现杂交带,则目的基因成功翻译出蛋白质。;;;(1)原理:将目的基因插入含有两种抗生素抗性基因的载体时,如果插入到某种抗生素抗性基因内部,则会导致该抗生素抗性基因失活。如图,目的基因插入到四环素抗性基因内部,则四环素抗性基因失活。;(2)受体细胞可能有:

①含目的基因的细菌——无抗性

②含目的基因—目的基因的细菌——无抗性

③含质粒的细菌——有氨苄青霉素和四环素抗性

④含质粒—质粒的细菌——有氨苄青霉素和四环素抗性

⑤含重组质粒的细菌——有氨苄青霉素抗性;(3)筛选方法:

①将转化后的细菌放在含氨苄青霉素培养基上培养,能生长的是含重组质粒的细菌、含质粒的细菌和含质粒—质粒的细菌,如图1、2、3、4、5菌落;

②再利用灭菌的绒布影印到含四环素培养基上,不生长的即为含目的基因的菌落,如图1、5。最后,可在含氨苄青霉素的培养基上挑取1、5菌落进行培养。;双抗性实验——个体水平;双抗性实验——个体水平;利用特定表型:蓝白斑筛选——个体水平;;;双酶切法——分子水平;PCR法——分子水平;PCR法——分子水平;PCR法——分子水平;

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