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白细胞分类计数技术;基本操作流程;1.制作血涂片;血涂片的推制1:载玻片的左手持法。
左手拇指和中指持载玻片。;血涂片的推制2:滴加血样
用塑料吸管吸取少量抗凝全血,管口轻触载玻片1/4处,使载玻片蘸上半滴全血。;血涂片的推制3:盖玻片持法
右手拇指、中指夹持盖玻片两缘,食指轻压玻片表面,将选好的盖玻片平滑边压在载玻片上血滴的前方,两玻片夹角30°左右;后拉盖玻片至接触血滴,待血滴扩散成线。;血涂片的推制4:推片
右手拇指、食指在夹持盖玻片的同时,也夹持了载玻片的两条边,并以之为轨道前推盖玻片,直至载玻片的尽头。
注意:对高黏度血液,应尽量减小玻片间的夹角。;未染色的干燥血涂片。
要取得好的血涂片,应注意:
1,推片时用力要均匀;
2,推片速度适中;
3,玻片间夹角应固定。;需要注意的问题;2.染色(瑞氏染色/瑞氏-吉姆萨染色);影响染色效果的因素;高倍镜下推制和染色良好的血涂片
(400×5)
红细胞呈灰红色,单层排布,细胞间稍有间隙,基本不相重叠和挤压。;推片不良的血涂片(瑞氏染色)
1000×5
血细胞叠加、堆积;染色不良的血涂片(瑞氏染色)
1000×5
染料沉渣过多;3.镜检与分类计数;;犬
嗜中性分叶核粒细胞
瑞氏染色,1000×5
为成熟的嗜中性粒细胞。细胞呈圆形,胞浆淡粉色,胞浆内有多量紫红色细小颗粒;核紫色,形状多样,常分成2~3叶,叶之间有细丝相连。;犬
嗜中性杆状核粒细胞
瑞氏染色,1000×5
属未成熟的嗜中性粒细胞。核微呈肾型,染色稍淡,或呈带状,两边平行。;犬
杆状核与分叶核粒细胞比较
瑞氏染色,1000×5
;犬
淋巴细胞
瑞氏染色,1000×5
分大、小淋巴细胞两种,小淋巴细胞呈圆形,比嗜中性粒细胞稍小,核蓝紫色,圆形或肾型,胞浆少,蓝色。大淋巴细胞较中性粒细胞稍大,胞浆相对较多,天蓝色。淋巴细胞胞浆清澈透明。;犬
单核细胞
瑞氏染色,1000×5
通常较其他血细胞大,核蓝紫色,但较淋巴细胞核色淡。核呈肾型、多角形等,形状不规则;胞浆较多,呈浅灰蓝色,有时内含大小不等的空泡和灰尘样颗粒。;犬
嗜酸性粒细胞
瑞氏染色,1000×5
大小、形态??嗜中性粒细胞近似,但胞浆内含有较粗大的嗜酸性颗粒,颗粒常呈灰红色。;犬
单核细胞与嗜酸性粒细胞比较
瑞氏染色,1000×5
上:嗜酸性粒细胞
下:单核细胞;犬
嗜酸性粒细胞与嗜中性杆状核粒细胞比较
瑞氏染色,1000×5
上:嗜中性杆状核粒细胞
下:嗜酸性粒细胞;犬
单核、淋巴与嗜中性杆状核粒细胞比较
瑞氏染色,1000×5
;犬
嗜碱性粒细胞
瑞氏染色,1000×5
大小、形态与嗜中性粒细胞近似,但胞浆内含有较粗大的深蓝黑色颗粒,核分叶不明显。为犬血液中含量最少的白细胞。罕见。;猫
嗜中性分叶核粒细胞
瑞氏染色,1000×5
;猫
嗜中性杆状核粒细胞
瑞氏染色,1000×5
;猫
淋巴细胞
瑞氏染色,1000×5
;猫
单核细胞
瑞氏染色,1000×5
;猫
嗜酸性粒细胞
瑞氏染色,1000×5
胞浆内嗜酸性颗粒粗细程度中等,颜色常较鲜明。;猫
嗜中性分叶核粒细胞与淋巴细胞
瑞氏染色,1000×5
;香猪
嗜中性杆状核粒细胞与分叶核粒细胞
瑞氏染色,1000×5
;香猪
有核红细胞
瑞氏染色,1000×5
;兔
嗜中性粒细胞
瑞氏染色,1000×5
兔的嗜中性粒细胞比较特别,其胞浆颗粒着色鲜红,与其他很多动物的嗜酸性粒细胞形态相似。;兔
嗜碱性、嗜酸性与嗜中性粒细胞
瑞氏染色,1000×5
兔的嗜中性粒细胞与嗜酸性粒细胞胞浆颗粒着色均鲜红,较难区分,区别主要在嗜酸性粒细胞胞浆颗粒较粗大。;血液检验;1.红细胞(RBC);I.红细胞增多a:相对增多(浓血症);I.红细胞增多b:绝对增多;II.红细胞减少a:正常减少;II.红细胞减少b:加速红细胞丢失;III.红细胞生成减少;IV.红细胞相对减少;患犬严重白细胞减少及严重贫血;2.红细胞比容(HCT);I.深黄色血浆;II.无色到淡色或乳白色血浆;III.脂血血浆;双相现象;淡黄层(白细胞层);3.血红蛋白(HGB,Hb);4.红细胞平均值的计算;I.红细胞平均容积(MCV);MCV变化的临床意义;II.平均红细胞血红蛋白量(MCH);III.平均血红蛋白浓度(MCHC);根据红细胞平均值计算的贫血类型;5.再生性贫血和非再生性贫血的区别;6.红细胞沉降速率(血沉,ESR);ESR加快的临床意义;血液检验
WBCPLT;WBCPLT检验与分析的主要内容;1.WBC计数;不同动物的白细胞总数和分类计数;WBC生理性增多;WBC病理性增多;WBC减少;WBC减少;2.中性粒细胞(NEU);NEU增多的临床意义(1);NEU增多的临床意义(2);核指数
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