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两性霉素B微生物限度检

查方法验证方案

两性霉素B微生物限度检查方法验证方案

目录

一、验证目的

二、验证参与人员与职责

三、验证方案内容

四、验证数据收集

五、验证结果与评价要求

六、验证方案批准

两性霉素B微生物限度检查方法验证方案

一．验证试验目的

通过本次验证试验制定出一整套具体有效的方法，对两性霉素B原料的药

微生物限度项目进行检查，其中包括细菌、霉菌、酵母菌计数方法，大肠埃希菌

检查方法及沙门氏菌检查方法，通过这些检查方法对两性霉素B原料药的微生

物限度进行严格控制，以确保产品质量。

二．验证参与人员与职责

姓名部门职务分工与职责

张玉莲QA经理审核验证文件

李萍QC经理组织指导验证工作

姜昕琰QC副经理整理验证文件

卞瑾妮QC分析员负责验证项目的分析测试

曹琼QC分析员负责验证项目的分析测试

三．两性霉素B微生物限度检查验证方案内容

1．验证对象：两性霉素B原料药

2．验证依据：企业标准

3．实验设备

恒温培养箱30℃～35℃、35℃～37℃

移液枪

4．验证所使用的供试品、菌种及试剂

供试品：两性霉素B原料药

供试品批号：AI070401

AI070402

AI070501

菌种：①大肠埃希菌[CMCC（B）44102]

②金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]

③白色念珠菌[CMCC(F)98001]

④乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B)50094]

试剂：

营养琼脂培养基、改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、

胰蛋白胨大豆琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4-甲基伞形酮葡萄苷酸培养基、

四硫磺酸钠亮绿基础培养基、胆盐硫乳琼脂培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基、

磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、蛋白胨、靛基质

5．验证的测定方法

5.1菌种培养及计数

从大肠埃希菌斜面上取一环大肠埃希菌培养物，至营养肉汤培养基中，置

30℃～35℃恒温培养箱中培养22小时。

从金黄色葡萄球菌斜面上取一环金黄色葡萄球菌培养物，至营养肉汤培养基

中，置30℃～35℃恒温培养箱中培养18小时。

从白色念珠菌斜面上取一环白色念珠菌培养物，至改良马丁培养基中，置

23℃～28℃恒温培养箱中培养24小时。

从沙门氏菌斜面上取一环沙门氏菌培养物，至营养肉汤培养基中，置35℃～

37℃恒温培养箱中培养22小时。

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取1ml菌悬液至9ml0.9%灭菌生理盐水中，制成10菌悬液。取1ml10菌

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悬液至9ml0.9%灭菌生理盐水中，制成10菌悬液。依此类推至10菌悬液。

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