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酶活性计算(以CAT为例)
首先将紫外分光度计UV2450上的数据导入Excel2003中,具体步骤:操作 数据打印 拷贝数据(时间与吸光值必须一一对应)
2、在Excel2003中,以时间为横坐标,吸光度为纵坐标作出酶活趋势线(作图如下所示);
插入 图表 散点图 下一步 选中行(R)
点击 鼠标选中所有的时间作为行(R) 同理得到所有的吸光值作为列(L) 点击下一步 在数据标志,分隔符中选中逗号 完成即得到趋势线。
作图完成后 右击趋势线选中趋势线格式 弹出对话框,选择“显示公式”选项酶活趋势线公式 右击公式之后选择数据标志格式
将小数点位数修改为15位 随即就能得到斜率;
下图图即为为CAT酶在240nm处的吸光度曲线,从公式中可以得出斜率为0.001124691119691,并可按照公式计算出酶活性。
测定鲜重
Fw(g)
0.4
斜率/3.5
0.001124691119691/3
OD /s/g(Fw)
240
斜率/3.5/FW=
OD/min/g(Fw)
240
OD/s/g(Fw)*60s=
.5
CAT所测的酶活性就为0.01928 OD
0.000321
/min/g(Fw)
240
0.01928
240
注:由于该酶的测定值是3.5S读取一个吸光值,所以需要斜率/3.5
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