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随着传代次数的增加，连续培养细胞系遗传物质不稳定，不得将细胞存放于-20℃或-80℃冰柜中，因为细胞存在次低温条件下活力迅速降低。
细胞污染：
细菌污染
A B
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酵母污染
霉菌污染
初期PH值维持稳定，污染严重后PH值迅速升高，导致培养基浑浊。
病毒污染
一般不会对与其宿主物种不同的细胞培养物造成不良影响，通过电子显微镜检查、一组抗体的免疫染色，ELISA实验或者采用适当病毒引物的PCR技术可以检测出细胞为病毒污染。
支原体污染
唯一检测支原体污染的方法是采用荧光染色、ELISE、PCR、免疫染色、放射自显影
抗生素只能作为对付污染的最后手段而且只能短期使用，并应尽快撤出
适合贴壁的细胞和悬浮的细胞
基础培养基，减血清培养基，无血清培养基
PH值：大多数正常哺乳动物细胞系PH为7.4；成纤维细胞系适合轻度偏碱（pH7.4-7.7）
Sf9和sf21等昆虫细胞系最适合在PH值为6.2的环境中生长
温度： 大多数人和哺乳动物细胞系在36℃至37℃最佳昆虫细胞在27℃为最佳
禽类细胞在38.5℃最佳冷血动物（15℃-26℃）
动物细胞形态划分：
成纤维细胞，贴附生长
上皮样细胞呈多角形，贴附
淋巴母细胞样细胞呈球形，不贴附
特殊形态：
I型有长突触
Ⅱ型没有轴突
细胞增长模式
何时传代？
哺乳动物：生长的PH值通常表示乳酸储积，且有毒性，当PH迅速降低（）
0.1-0.2PH单位），同时细胞浓度增大，则应对细胞进行传代。
昆虫细胞PH值会上升但不超过6.412．贴壁细胞的解离
贴壁细胞的传代
贴壁昆虫细胞传代：
悬浮细胞传代流程
细胞冻存：
冷冻细胞解冻方案：
利用血球计数器进行细胞计数：
台盼蓝拒染法：
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n.利用瓜坎计数器测定细胞系总液的组泡密度。
2.用夺泡缓冲盐溶液（即顽酸盐氓冲液｝配制浓度为()4%．pH值为7.2至）．l的合研蓝溶液·
3,问1ml纽胞中加入0.1ml台岈廷饵存溶液·
蠡，取适量妇胞样品加王皿戌计数名上．立即在让侣显敬弦下检妥·
5.计数蓝染细挖数和O贮问数．对干世森的对数期细胞而古．纪胞存活罕至少应达到劣也纪胞存活举（％巨(1.OO-（廷换茫胞数 ＋总细舱数）lx100
要计滇句泛升培井物中活细胞的数量，则应使用以下公式 切记要闻稀释因子进行校正．
活纪胆坎又10又1.1＝芒汪升均齐物中的纪胞数
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