纤维素酶生产菌筛选.ppt

纤维素酶生产菌的筛选姓名：XXX专业：XXX学号：XXX指导老师：XXX

纤维素酶来源纤维素酶种类纤维素酶菌种选育纤维素酶活性测定纤维素酶菌种选育现状及发展趋势

纤维素酶来源纤维素酶在自然界的分布很广泛，昆虫、软体动物、高等植物、细菌、放线菌和真菌都能产生纤维素酶，甚至哺乳动物中的反刍动物的瘤胃及猪大肠中也有能够分解纤维素的细菌存在。植物纤维素酶含量少，且不易提取；动物体内对于纤维素的消化主要是依靠其消化道内共生的微生物、原生动物来完成的，研究过程复杂，且成本高。因此，目前纤维素酶的运用主要集中在微生物纤维素酶的运用上。其中研究较多的有木霉属、曲霉属、根霉属和漆斑霉属。

纤维素酶种类纤维素酶是一种高活性生物催化剂，是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称。它是由起协同作用的三个主要组分，即：葡聚糖内切酶(EG，C1或CMC酶)、葡聚糖外切酶(CBH，cx)、β-葡萄糖苷酶(BG)组成的诱导复合酶系。CMC酶CBH酶BG酶纤维素易于水解的纤维素分子纤维二糖纤维三糖葡萄糖

纤维素酶活性测定单一纤维素酶组分活力（利用可溶性底物测定）CMC法：用于内切酶活力的测定pNPC法：用于外切酶活力的测定（操作简单且能较准确地区分并测定相应的活力）纤维素酶总活力（利用不溶性的底物进行测定）一般都是以产物的形成速率(功能的体现)来表征，最常用的纤维素总酶活测定方法是利用标准滤纸为底物测得的滤纸酶活(FPA)。

纤维素酶菌种选育选育优良菌种是提高纤维素酶活力的关键。通常有下面三种菌种选育方式:1.自然选育从均有纤维素分解能力的菌源中筛选分离产纤维素酶的菌种，主要目的是发现比现有菌株产酶能力高的菌株。自然选育是利用菌种的自发突变而选育出优良菌种的。自发突变的频率较低，出现优良性状的可能性较小，并且选育出来的野生菌种大多产酶量少，且活性较低。

纤维素酶菌种选育2.诱变育种通过物理、化学诱变剂对菌株进行处理，获得高产酶能力的突变菌株。诱变育种是得到高产菌株的一种简单有效的方法，能够大幅度改变菌种的遗传特性，从而获得高产突变菌株，具有方法简单、快速、收效显著等特点。诱变育种的方法包括物理诱变、化学诱变和物理化学交替诱变，现在一般采用复合诱变方法进行筛选。缺点：容易发生回复突变。

纤维素酶菌种选育2.诱变育种选取合适的土样或水样↓初筛（通过刚果红培养染色，取水解透明圈与菌落直径较大的菌株）↓复筛（滤纸条法等方法）↓高产菌株产酶活性条件优化

纤维素酶菌种选育3.构建工程菌利用基因工程技术将纤维素酶基因克隆到细菌、酵母、真菌和植物中，筛选酶活力高的重组型产纤维素酶菌株。与诱变育种相比，DNA重组进行菌种选育具有良好的定向性。能够集多种优势于一身，表达出我们需要的各种性状和优势，为纤维素酶底物利用范围扩大，以及酶催化活性、产量、热稳定性和乙醇、葡萄糖耐受性的提高等方面的研究提供了新的技术手段和途径。应用于纤维素酶菌的基因工程技术主要有基因重组技术、基因定位突变技术和细胞融合技术。

纤维素酶菌种选育现状为了找到理想的高产菌株,还需在以下几个方面加强研究:(1)在纤维素酶最有利的生长的环境条件下进行筛选;(2)同时筛选几种类似功能的酶用于相关方面的应用研究;(3)筛选不同土壤环境,从中选择出较好的纤维素酶。

纤维素酶菌种选育发展趋势高产量,高活性的纤维素酶生产菌种的筛选及诱变育种。利用基因工程技术来改造菌种，克隆表达高活性、高稳定性、高产量的纤维素酶。混合菌种的研究,混菌发酵可以弥补菌种产生的纤维素酶系的不同，产生多种不同功能的酶，大幅度提高纤维素酶的活性。针对不同工业需要研制不同组分比例的纤维素酶，开发适应不同温度(低温或高温纤维素酶)的纤维素酶等。

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