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HSP22对缺氧复氧损伤人脐静脉内皮细胞保护及其机制的开题报告

一、研究背景

缺氧-复氧（hypoxia-reoxygenation，H/R）是一种普遍存在于各种疾病情况下的重要病理生理过程，如心肌梗死、脑卒中、创伤、感染等均可能引起此过程。缺氧-复氧可导致内皮细胞（endothelialcells，EC）受到严重损伤，从而引发血管病理性生理异常。

热休克蛋白（heatshockprotein，HSP）是细胞中具有抗压能力的重要分子，具有保护细胞免受不良环境压力的能力。其中，HSP22是小分子热休克蛋白之一，具有抗氧化、抗凋亡和细胞重构等重要作用。

二、研究目的

本研究旨在探究HSP22在人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells，HUVECs）中的保护作用，并研究其作用机制。

三、研究内容

1.构建H/R模型

采用缺氧罐室+大气通气的方法使HUVECs模拟缺氧状态，之后使其恢复正常供氧，以模拟缺氧-复氧的病理生理环境。

2.HSP22干预

通过细胞转染技术将HSP22的过表达载体转入HUVECs，使得其能够高表达HSP22；或者使用小分子化合物诱导HUVECs高表达HSP22。

3.检测HSP22对HUVECs的保护作用

采用MTT法、细胞存活率检测、细胞凋亡检测等方法，检测HSP22的表达是否能够保护HUVECs的生存和减轻缺氧-复氧对其的损伤。

4.探究HSP22的抗氧化作用

采用DCFH-DA荧光探针、MDA检测、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）活性等方法，检测HSP22是否能够降低HUVECs的氧化应激水平。

5.探究HSP22的细胞信号通路

采用Westernblotting检测凋亡相关几种蛋白的表达水平，包括Bcl-2、Bax等；同时，通过phospho-kinasearray对HUVECs的信号通路进行研究。

四、研究意义

本研究将为认识HSP22对血管内皮损伤的保护作用提供新的认识，并增进人们对于H/R状态下细胞生存和凋亡的认识。进一步研究还可为探索HSP22在治疗心脑血管疾病方面的应用提供新思路。