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邻二氮杂菲分光光度法
测定微量铁
了解分光光度计的结构、性能，学
会使用722N型光度计。
掌握分光光度法的测定原理，并
用邻二氮杂菲法测定微量铁。
学会绘图处理实验数据的方法。
1.分光光度法原理
被测组分在一定条件下加入显色剂，发生显色反应，生
成具有颜色的物质，而一定颜色的物质对特定波长的单色光
具有选择性的吸收，根据吸光物质对一定波长的光的吸收程
度确定物质的含量。
？
吸光度物质的含量
1.分光光度法原理
根据朗伯比耳定律：当入射光波长λ和吸收池光程
b一定时，吸光度A与浓度c成线性关系。
A-lgTεbc（定量依据）
A—吸光度
I
Tt
T—透光率（）
I
0
b—液层厚度（cm）
c—溶液中物质的浓度（mol·L-1）
—摩尔吸光系数（L·mol-1·cm-1）
1.分光光度法原理
Aεbc
摩尔吸光系数与温度、溶液的性质及入射光波长有关。
当入射光波长λ一定时，为定值；A
当比色皿确定时，比色皿厚度b为定值；
A
x
显色物浓度c与A成正比例关系，
可通过标准曲线法测定未知试样的0cx-1
mgL
浓度。邻二氮杂菲亚铁溶液的标准曲线
2.分光光度计构造
光源单色器检测记录
（钨卤素（连续光吸收池系统系统
灯，330-（检流计：
谱→单色（比色皿）（光信号
800nm可测量光电
光）→电信号）
调）流）
3.显色反应原理
N
3NN+Fe2+Fe
N
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